双酶切鉴定

感觉你提出来的不是你的目的质粒，或者是你的酶都坏了？（感觉可能性不大），所以建议你最好送个测序看看。

有可能长出来的是杂菌，质粒没有构建成功。

建议转化后可以直接挑单克隆摇1h菌送测序，第二天就能有结果。

有可能是分离纯化质粒的过程出现了问题，导致后续酶切出现问题