Smile-li
目的片段和表达载体双酶切产物胶回收做转化,转化有一步复苏菌液,1个小时没摇浑,然后涂板,长出了菌落,但摇菌10个小时都没浑,pcr鉴定没有目的片段,这种情况如何解决呀
balalaLy
没看明白你的问题,酶切产物胶回收做的转化?这就没有完整的质粒呀,不是应该胶回收后的连接产物再转化吗?你长出来的克隆应该是杂菌。
bamboopiggy
你是不是缺了一步连接?然后活化菌的那一个小时菌液不会太混,但是感觉你这个长的是杂菌
Smile-li
少写了连接,连接过夜了
申东熙老伯
这种就是目的片段和表达载体没有连接上,酶切胶回收这一步没出问题的话,建议重新连接。
汤姆卜丽波
有可能是回收没收回来也有可能是你连接的时候比例不对没连上