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求助 BCA测蛋白浓度样品加多了有影响吗

相关实验:用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验

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Linney_Chun

请问各位大佬,用96孔板测bca蛋白质浓度的时候,200uL工作液本来应该加25uL样品,但现在包括标准样品和待测样品都加了30uL,这样算出来的标准曲线是不是也是不能用了呀?有什么其他公式可以算回去的补救措施嘛,还是只能重测呢?

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6 个回答

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whilt-shirt

有帮助

这个不影响,结果是直接能用的。

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天一湖医者

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肯定有影响啊,样品加多一般就是是超过了标准曲线的最高点,标准曲线是同一蛋白浓度的数值曲线。在一定的浓度范围内,曲线中的点可以连成一条直线,当超出这个范围,因为反应时间或者底物浓度的限制,这些点连成的直线逐渐变成曲线。所以超出标准曲线的点测得的实际值会明显低于其真实值。

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bamboopiggy

有帮助

标曲和样本的,都加30ul的话,可以用的,没问题。但是你可以把标曲里面对应的蛋白浓度改一下就好。

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麻黄连翘赤小豆

有帮助

不能用了,建议重测,不要有侥幸,不然数据没法用

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

可以用的,因为都是等体积的,所以最终按照对应的吸光度可以计算浓度

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府宅

有帮助

加多了容易测不出来,会超过浓度最高阈值

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