求助 BCA测蛋白浓度样品加多了有影响吗

Linney_Chun

2022-08-01

请问各位大佬，用96孔板测bca蛋白质浓度的时候，200uL工作液本来应该加25uL样品，但现在包括标准样品和待测样品都加了30uL，这样算出来的标准曲线是不是也是不能用了呀？有什么其他公式可以算回去的补救措施嘛，还是只能重测呢？

whilt-shirt

2022-08-01

有帮助

这个不影响，结果是直接能用的。

天一湖医者

2022-08-01

有帮助

肯定有影响啊，样品加多一般就是是超过了标准曲线的最高点，标准曲线是同一蛋白浓度的数值曲线。在一定的浓度范围内，曲线中的点可以连成一条直线，当超出这个范围，因为反应时间或者底物浓度的限制，这些点连成的直线逐渐变成曲线。所以超出标准曲线的点测得的实际值会明显低于其真实值。

bamboopiggy

2022-08-01

有帮助

标曲和样本的，都加30ul的话，可以用的，没问题。但是你可以把标曲里面对应的蛋白浓度改一下就好。

麻黄连翘赤小豆

2022-08-01

有帮助

不能用了，建议重测，不要有侥幸，不然数据没法用

dxy_gwrp7ndq

2022-08-01

有帮助

可以用的，因为都是等体积的，所以最终按照对应的吸光度可以计算浓度

府宅

2022-08-01

有帮助

加多了容易测不出来，会超过浓度最高阈值

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