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造成 qPCR 实验中无逆转录酶阴性对照出现假阳性的可能原因有哪些?

相关实验:痘苗 DNA 检测实验

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dxy_zzufrkx7

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3 个回答

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whilt-shirt

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有可能是误加了有逆转录酶的试剂

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未来9

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假阳性的原因:
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。
1)引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增 时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。
2)靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个基因组或大片段的交叉污染,导致假阳性。

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bamboopiggy

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水,引物

污染了,引物没有跨外显子设计。

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