菌液pcr检测重组质粒跑出来条带很弥散，是怎么回事，胶没问题

可能原因1.酶切时间有些长，因为定性试验，产物的量不甚准确，建议将酶的量做一个梯度，但不是将酶浓度稀释，这一点切记；2.镁离子浓度可能有些不适合，建议做一下调整。

可能是电压不稳定，电泳缓冲液不太干净，存在污染，退火时间过短，等等

菌落pcr 条带弥散没什么，因为菌落里很多杂七杂八的东西，只要你要的目的条带能出现就可以。或者也可能是你的buffer，或者是胶配的不匀，感觉你的marker也有点弥散

通常是非特异扩增过多引起，提高退火温度试试。PCR产物放置过久考虑产物降解；如果是PCR后及时上样，考虑引物特异性较差或者模板不纯（包括降解以及掺有别的DNA序列）。如果用PCR产物做模板的话，量太大也会有这个现象。

重组质粒条带弥散的原因：

1、PCR体系中存在污染
2、电泳槽中电泳缓冲液不净
3、电压不稳定
4、如果PCR的模板是经过酒精提取的质粒等相关DNA,则酒精没有除净
5、退火时间过长或过短,延伸时间过短等