为什么我的扩增产物滞留在加样孔中!

在加样孔没有跑，电泳的电压不够也是原因，或者胶的浓度和电泳液浓度不一样，或者你的胶正负极放反了。

首先检查电泳仪，是否通电。

检查胶块是否有问题。

最后可能是你的样本浓度过高，建议稀释。

因为你pcr的时候，加的模板量多了，从而使得你的PCR产物是高分子量的DNA胶状物。pcr的模板不用加太多，按照你用的扩增酶的说明书来加。

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一般在菌液或菌落PCR时会出现这种情况，是因为模板量过多，菌体破碎后蛋白质阻塞，把核酸截留在点样孔中。减少模板量或模板用无菌水煮沸破壁后离心取上清。

有可能是由于模板量过高而导致PCR结果产生了高分子量的DNA胶状物。建议将第一链结果至少稀释100倍再进行二次扩增。

　　另外，在二次PCR时使用的退火温度如果比引物的Tm值低5℃，可以将退火温度适当增高或进行热启动以提高特异性。