构建重组载体转化大肠后测序，序列总有突变，可以从那些方面分析原因？

老陈味

2022-03-18

闭门羹牛

2022-03-18

有帮助

可能酶产物碎了一些，这样连进去就有大有小。如果你引物用的是在载体上的，那很可能扩出大小不同的。如果你引物就是在基因上的，这个好解决，你把退火温度逐渐提高，看看是不是那个不同片段就没了

vae1476

2022-03-18

有帮助

可以多做几个，多选几个克隆进行测序，保证总有一个是好的，需要注意要用高保真酶

bamboopiggy

2022-03-18

有帮助

首先把你的模版拿去测序，我遇到过因为模版有问题，结果怎么改条件都不行。2.如果实在不行，设计引物，把突变的地方再给它突变回来。我当时就是发现模版也有mutation，只能自己给它纠正回来

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