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科研学霸天团，48小时有问必答
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问
图里显示的是我在NCBI上寻找的一个蛋白序列的资料页面截图，请问这里的相关文献怎么查找啊？按照图里的信息找不到
Eason老歌迷
打开NCBI主页；左边search里面选择GENE 右边的对话框里输入你想要的基因名称；在出来的所有条目第一行后面都有种属表明，比如Homo sapiens是人Felis catus是猫。选择你想要的种属；再出现的页面中找到那个像数轴的图，在左侧有可以点击的蓝色数字，往往开头有AK、NM的开头，点击它，再出现的下拉框里选择GENEBANK；最下面就是他的基因序列 当然也可以参考页面上提供的CDS区
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问
关于电转化
balalaLy
电转所需要的质粒量大概在250ng左右，小提操作没问题的话可以满足
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问
涂板长了两层菌
Eason老歌迷
是不是你的抗生素失效了，我觉得根据你的情况这种可能性很大，倒平板培养基时一定要保证至少50度以下,否则弄不好抗生素就失效。
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问
流式细胞术检测细胞凋亡
Eason老歌迷
可能是你机器没调好，另外你可以多做几组对照一下。
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问
A549转染后形态改变 活性也不太对
balalaLy
加完病毒液之后多久换液？建议早点换液，一般看细胞的状态，状态不好20小时左右就得换液了。
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问
电转化质粒浓度
balalaLy
质粒浓度一般100ng/ul左右，1:25的体积比例加到感受态中
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问
用raw264.7诱导破骨细胞，加rankl 100ng/ml, m-csf 50ng/ml,诱导9天，trap 染色
天一湖医者
收到细胞后：内含的纸条上建议马上/尽快传代，换新的培养瓶和培养液。我的经验是直接将细胞放到培养箱中适应环境数小时或过夜。
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问
DNA杂交实验中的解离问题？
天一湖医者
可能已经降解了,严格进行操作吧.
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问
各个器官细胞，有什么独特的表面标志物，可以用抗体靶向？
Eason老歌迷
这个要是细讲起来就复杂了，我就拿几个常见的来举例吧，肝细胞癌的特异性标志物是AFP也就是甲胎蛋白。这些都是可以查到的，你用哪个细胞，你就去网上查一下文献就有。
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问
小鼠F0代生下的第一窝仔鼠为F1代，第二窝为F2代，第三窝为F3代吗？那如果F1代的小鼠进行合笼后生下的仔鼠该怎么命名，是第几代
Eason老歌迷
原则:F0代小鼠之间不能相互交配。F1代及F1代之后繁育原则：由F0代小鼠和野生型背景鼠交配得到的后代小鼠称为F1代。)阳性F1代小鼠可用于保种建系。那还是f2
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有人用阿佛丁针灸时麻醉吗？
balalaLy
阿佛丁属于国外比较公认但国内用的少的麻药，我做肌电生理是可以用的，麻醉应该也能用吧
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问
抑郁症模型旷场实验的结果是反的，是什么原因呢？
balalaLy
任何实验出现阴性结果或者反向结果都是有可能的，排除掉各种操作误差，重新再做就是了，一次说明不了问题
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问
镍柱纯化，bufferA冲不出来杂蛋白峰
Eason老歌迷
是不是色谱柱的问题，色谱柱对样品具有很高的选择性，如果在气相色谱仪使用中选用了与所进样品极性不相符的色谱柱，或选用色谱柱与样品会发生反应，则有可能造成样品无法正常到达检测器，从而无法出现相应的样品峰。色谱柱选用不合适原因造成的不出峰，可以通过选用与样品相适应的色谱柱解决。
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问
可以用丙酮提取细菌中的化合物吗
天一湖医者
可以，可以用丙酮提取细菌中的化合物。
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问
镍柱纯化目标蛋白，杂蛋白分离不开
秋秋欣欣
可以使用咪唑梯度洗脱，杂蛋白说明纯化有问题
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问
包装完的慢病毒的基因组是怎样的？有没有详细介绍慢病毒的书籍？
bamboopiggy
早期的慢病毒载体，是由人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）改装而来，包括HIV-1型载体系统和HIV-2型载体系统。慢病毒属于反转录病毒。HIV-1为双链RNA病毒，它的基因组结构和其他的反转病毒类似，含有可编码三种主要病毒结构蛋白的基因，即gag、pol和env，gag基因编码病毒的核心蛋白如核衣壳蛋白（p7）、内膜蛋白（p17）和衣壳蛋白（p2
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问
卡那霉素残留的测定（培养法）
天一湖医者
采用卡那霉素检测酶联免疫试剂盒分别检测供试品和标准品的吸光值(od值)；根据供试品和标准品的吸光值判断供试品中卡那霉素的残留量与标准品浓度的大小：
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Southern Blot电转法
天一湖医者
操作方法 1. 在琼脂糖凝胶上电泳分离DNA。取出凝胶，切去边缘多于部分，EB染色，在紫外灯下照相（放一标尺，可从像片中读出DNA迁移的距离）。 2. 将凝胶置于200mL变性液中，浸泡45分钟，并温和地不断振荡，使凝胶上的ds-DNA转变为ss-DNA，然后用重蒸水冲洗凝胶几次。 3. 用中和液浸泡凝胶并不断地振荡45分钟，将凝胶中和至中性。防止凝胶的碱性破坏硝酸纤维膜。 4. 取一个瓷盘，在底
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问
ROS流式检测
balalaLy
我也做过过氧化氢处理后的流式检测，也出现过这种情况，一个是处理细胞时操作不能太粗暴，另一个是过氧化氢的浓度和处理时间不能太高太久
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问
如何提高单细胞测序的成功率？
balalaLy
经过组织酶解消化产⽣的细胞碎⽚和游离RNA产⽣严重的背景⼲扰，操作过程中应尽量去除这些干扰因素
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