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镍柱纯化,bufferA冲不出来杂蛋白峰

相关实验:含有多聚组氨酸标签重组蛋白纯化实验

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idiotOC0P

buffer a冲不出来任何峰,换bufferb才冲出来一个峰,做了两三次都只有一个峰,杂蛋白根本就没有分离啊,做电泳检测也确实不纯

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2 个回答

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冷泉港蛋白

有帮助

你的疑问是,峰型单一和电泳多条带之间的矛盾。

如果是蛋白多聚体的话就可以解释了,bufferb可以洗脱蛋白与镍柱的结合但不能解离开多聚体,然而电泳中的sds足以解离蛋白之间的互作,出现单体 二聚体 多聚体等。

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Eason老歌迷

有帮助

是不是色谱柱的问题,色谱柱对样品具有很高的选择性,如果在气相色谱仪使用中选用了与所进样品极性不相符的色谱柱,或选用色谱柱与样品会发生反应,则有可能造成样品无法正常到达检测器,从而无法出现相应的样品峰。色谱柱选用不合适原因造成的不出峰,可以通过选用与样品相适应的色谱柱解决。

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