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科研学霸天团，48小时有问必答
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血液流变学检测哪一种方法更合理？
Eason老歌迷
血液黏度是血液最基本的流变特性。血液黏度测定包括全血黏度和血浆黏度测定。血液黏度的单位以 mPa·s表示。血液黏度测定的方法主要分两大类，一类是毛细管黏度测定法，另一类是旋转式黏度测定法。我觉得第一类方法更合理。
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问
血液流变学检测怎么保证准确性？
Eason老歌迷
为保证检测的准确性，应特别注意采血时间及摄食时间。在采血方式上，也应注意避免造成血粘度误差的因素，如采血时压脉带的压力大小、血管受压时间长短等均对血粘度检测结果有所影响，血管在较高的压力下受阻时间长，则血液会有所浓缩。抗凝剂的正确使用也是保证检测准确性的关键之一。因草酸盐或枸橼酸钠等抗凝剂可引起细胞的形态改变、影响红细胞的聚集性和变性能力，导致血粘度检测不准确。
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问
敲除基因后的基因组与野生型基因组如何比对序列？
Eason老歌迷
可以通过pcr鉴定的方式来确定。也可以用dna序列软件，进行测序结果与野生型序列进行比对，如果发生非3倍数的indel，则说明该细胞系在基因组水平上已经实现了敲除。
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问
壳聚糖有还原性吗？会还原二价铜离子吗？
Eason老歌迷
没有。但是它壳聚糖可以吸附铜离子。
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问
条件培养基的制备过程中的坑！
bamboopiggy
1000rpm，10min或者是3000rpm，5min就可以。)后0.22um滤器过滤，这些的目的都是去除培养基中的细胞。不需要测定营养物质的消耗，条件培养基，主要是收集细胞分泌的促增殖的物质，来促进细胞增殖的。
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问
流式分析求助
Eason老歌迷
7AAD就行。上下相差很接近。
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问
外泌体保存
天一湖医者
要验证血液外泌体里的目的基因，可以直接保存血液。
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问
阿霉素大鼠尿蛋白差异太大怎么办？
Eason老歌迷
个人感觉是你的鼠尾注射没有操作好。说到底尾静脉注射技术就像投篮一般，有的时候蒙一下能进，或者手感热的时候连续进球，但其他时候还是不够稳定。如果想要提高成功率还是需要在找对方法的情况下，经常练习手感。至于姿势问题大家不必拘泥，我也只是把对我而言最合理的姿势分享给大家，各位在练习的过程中也可以微调，毕竟无论教科书般的投篮姿势还是端尿盆儿，只要能进球就好。
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问
诱导小鼠体内巨噬细胞的极化
Eason老歌迷
具体参看这篇文献，Physical Confinement in Alginate Cryogels Determines Macrophage Polarization to a M2 phenotype by Regulating a STAT-Related mRNA Transcription Pathway。
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问
用GFP的抗体去做磷酸化蛋白的wb，会出现两条带吗
bamboopiggy
会出现两条带，磷酸化的和total的。
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问
spss方差分析的题怎么做
Eason老歌迷
成对样本统计量 均值 N 标准差 均值的标准误 对 1 治疗前 122.1000 10 11.31813 3.57911 治疗后 112.1000 10 16.17577 5.11523 成对样本检验 成对差分 t 均值 标准差 均值的标准误 差分的 95% 置信区间 下限 上限 对 1 治疗前 - 治疗后 10.00000 11.95361 3.78006 1.44890 18.55110 2.
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问
查找相关序列求助！！！
bamboopiggy
找到那些代谢酶的基因序列，然后跟你的基因组DNA进行比对就可以
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问
求助：小鼠mcao模型
dxy_n2jej7q0
楼主，这个感觉是静脉啊，如果找到颈总动脉应该是有搏动的，旁边有伴行的动脉和神经，分叉口基本在上方斜行的肌肉下面，颈内是靠外侧那根，如下面这张图右侧下方是颈内，一般都是颈正中剪开皮肤
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问
裸鼠身上起了一层白色的皮，是什么原因
天一湖医者
一是动物质量的问题，二是有感染某种菌，三可能是药物的作用。
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问
镍离子柱填料保存问题
天一湖医者
镍柱填料在4℃冰箱里用20%乙醇可以长期保存。
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问
tunnel染色和annexin V两种细胞凋亡实验怎么选择呢
bamboopiggy
可以都做，互为验证。如果只能做一个，首选annexin v
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问
shRnA稳转株构建成功后需要隔段时间再次鉴定敲降效果吗？
bamboopiggy
一般三个月检测一次吧，我用的是带绿色荧光的，看荧光就可以
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问
构建稳转株是用哪种转染试剂好？PEI的使用方法如何？
bamboopiggy
只要能把质粒转进去，哪种转染试剂都可以，pei也可以，毒性低，效率高
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问
Saos2转染问题
Eason老歌迷
质粒DNA导入细胞有多种方法，包括物理介导（电穿孔法、显微注射和基因枪）、化学介导（磷酸钙共沉淀法、载体转染法等）和生物介导（原生质体转染、病毒介导的转染）三类途径。这三类技术中，又以载体转染法最为常用。国际上应用较早的转染载体多为脂质体类载体，但此类转染载体细胞毒性较大，转染效率往往也不够理想。近年类，纳米生物材料类载体的应用逐渐增多，此类载体最大的优点是细胞毒性较低，部分品牌载体的转染效率也显
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流式细胞仪检测细胞周期的话需要破膜染色吗？需要先固定细胞吗？使用什么破膜？谢谢各位大佬。
Eason老歌迷
需要破膜染色，比如说丙酮破膜法。先固定，可以拿甲醇固定。
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