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科研学霸天团，48小时有问必答
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有哪些小鼠结直肠癌肝转移模型
Eason老歌迷
目前人源性结直肠癌移植瘤（异种移植）模型主要分为两种，一种是将人源的结直肠癌细胞系接种到免疫缺陷小鼠体内，称为CDX模型（cell-line-derived xenograft），另一种是将来源于患者的结直肠癌组织块接种到免疫缺陷小鼠体内，称为PDX模型（patient-derived xenograft）。由于用作CDX模型的人源结直肠癌细胞系具有易获取，成瘤效果好，验证数据详实（有大量细胞功能
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问
脑定位注射 前囟确认
dxy_gwrp7ndq
两条脑缝相交的部位，取中间的点就可以了
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问
质粒转染
秋秋欣欣
是不是在这个基因或者载体上还有别的酶切位点啊
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问
转染实验开始前，需要对转染试剂本身对细胞活性的影响进行检测吗？
bamboopiggy
如果第一次用，还是检测一下比较好，否则正式开始实验了，如果有问题，就会措手不及。虽然一般转染试剂的毒性都不是太高。
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问
农杆菌侵染植物，污染和农杆菌如何区分
Eason老歌迷
一般很少有农杆菌污染的，你一般一次性接种农杆菌不要太多，还有就是可以在共培养时在愈伤和培养基间放一块滤纸，抑菌，减少污染。或者是你可以用0.1M的灭菌甘露醇去洗菌，效果也不错。
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问
不同剂量浓度药物对小鼠的疗效
Eason老歌迷
你可以根据之前的预实验结果，就是后续一直用单一浓度去给药，这个没问题的。
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问
各位大佬，如果大肠在一个培养箱培养，会不会交叉感染？为什么食品粉碎机和手部大肠会来回感染？怎样清理干净？
dxy_n4jex0k8
培养的时候可以用封口膜封好，培养结束后用酒精擦拭一下，用完的器具和台面可以高温灭菌和照紫外30min以上。
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问
DNA损伤标志物γ-H2AX焦点如何计数
dxy_gwrp7ndq
H2AX荧光焦点计数方法：(1)每个标本由2~3人（放射科医师和／或实验室技术人员）盲法下进行计数，计算平均值和标准差。(2）每个标本（细胞滴片）至少计数40个细胞（细胞数较多时）或40个焦点（细胞数较少时） 。(3）尽量避免选择细胞堆积、融合或微小异物、杂质较多的视野。
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问
悬浮细胞转染密度是多少
Eason老歌迷
一般转染时，悬浮细胞密度为 undefined10^6--undefined10^6 细胞/ml 时效果较好。确保转染时细胞没有长满或处于静止期。
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问
求问大家，这种分子分型的指纹图谱聚类分析图是怎么做出来的 尤其是右边分子量的图，求问。
Eason老歌迷
你可以把文件导入graphpad prism软件进行绘图，或者是networkanalyst在线分析。这种相关性的聚类分析都是一样的操作，analyze下面找到cluster analysis即可。然后要看你做指标还是变量聚类了，也就是R或者Q型。右边的分子量可以添加即可。
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问
质谱数据处理
Eason老歌迷
如果三组蛋白表达基因的丰度不一样，你肯定是要处理好数据，把丰度差距过大的舍弃。
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问
药品中的无菌检测的操作流程
你好几和户
将待检品放入采样车(或者洁净区操作台)，风淋30分钟以上(有紫外灯的，照射30分钟)，无菌操作开包取样，取样完毕后封好包装，移出采样车或者洁净区。一般的注意事项:取样器具的处理，待取样检品的包装处理，取样时要有无菌操作有菌意识，取样完毕要复原样品包装防止污染。
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问
非酒精性脂肪肝高脂小白鼠模型，在杀之前晚上禁食（不禁水）12小时，但是体重反而升高了，这是怎么回事？
Eason老歌迷
你做了几次实验，每一组多少只实验小鼠，我觉得如果你禁食不禁水，小鼠体重增加应该是和饮水有关。
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问
atp酶染色
Eason老歌迷
atp酶染色应该注意，切片一定要是新鲜组织的冰冻切片，不可以固定。Tris碱、氯化钙粉剂常温保存，硫化铵常温避光保存，ATP钠盐-20℃保存，其它染液4℃保存，使用前先复常温。工作液和1%硫化铵溶液要现配现用，不能保存。
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cd31荧光染色 是绿色还是红色呀？
麻黄连翘赤小豆
主要它一抗二抗是准确对应的，红色绿色荧光都可以
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问
基因多态性实验，基因测序结果分析
Eason老歌迷
你可以用gwas，dnastar来分析。然后你的测序结果与参考序列进行比对，当然前提你是知道你的参考序列的突变位置，如果你的参考序列上是A，而测出来的结果是T,那就是一个突变型，还有可能就是杂合突变。
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问
一种色素的降解产物是否用于另一种色素的合成，除了同位素标记还有什么生理生化的方法呢？
Eason老歌迷
除了使用同位素标记，你还可以使用标签，把降解产物标上标签
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问
大家有用过无血清体系培养iPSC吗？效果怎么样？
Eason老歌迷
我用过，效果还OK。主要是无血清培养基不含血清，提高了实验的重复性、准确性和稳定性。避免了血清所带来的血源性污染等问题，减少血清未知成分对细胞的损伤。无血清培养基的成分和含量相对明确，能提高细胞产品的质量并有利于产物的分离提纯。
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问
用FGF7因子做SNU-16细胞的促增殖实验，结果不稳定，重复不出来，且空白组比样品组还高为什么？
Eason老歌迷
如果空白组比样品组还高，说明你就没有促增殖，或者是没有成功让它促增殖。
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问
请问有人知道NapSul-Ile-Trp-CHO（icL)的作用机制吗？
Eason老歌迷
我看到过一篇文献，就是讲这个icl的，”溶酶体蛋白Cathepsin L在小胶质细胞激活中的作用”
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