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在得到γ-H2AX的免疫荧光染色图片后,如何对其中的焦点进行计数?在看到的文献中,横坐标为暴露物质浓度,纵坐标为细胞中平均焦点数(所有细胞核中的焦点数/细胞核个数),纵坐标范围在0~20之间,这说明所有细胞核中的焦点数并不会特别大,但是染色图片中是一片红色,因此什么算是有效焦点数?如何对焦点数目进行计数呢?感谢您的解答。
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H2AX荧光焦点计数方法:(1)每个标本由2~3人(放射科医师和/或实验室技术人员)盲法下进行计数,计算平均值和标准差。(2)每个标本(细胞滴片)至少计数40个细胞(细胞数较多时)或40个焦点(细胞数较少时) 。(3)尽量避免选择细胞堆积、融合或微小异物、杂质较多的视野。
Eason老歌迷
这种染色图,我建议你可以利用image pro plus软件,进行自动计数,点击“measure”,点击“count/size”,点击“automatic bright objects”,选中后,直接点击“count”,界面上“total count”,“in range”查看计数结果。
balalaLy
计数核中红色高亮的点,一张图中随机选取几个核计数取平均值