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科研学霸天团,48小时有问必答
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可以用丙酮提取细菌中的化合物吗
天一湖医者
可以,可以用丙酮提取细菌中的化合物。
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问
镍柱纯化目标蛋白,杂蛋白分离不开
秋秋欣欣
可以使用咪唑梯度洗脱,杂蛋白说明纯化有问题
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问
包装完的慢病毒的基因组是怎样的?有没有详细介绍慢病毒的书籍?
bamboopiggy
早期的慢病毒载体,是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)改装而来,包括HIV-1型载体系统和HIV-2型载体系统。慢病毒属于反转录病毒。HIV-1为双链RNA病毒,它的基因组结构和其他的反转病毒类似,含有可编码三种主要病毒结构蛋白的基因,即gag、pol和env,gag基因编码病毒的核心蛋白如核衣壳蛋白(p7)、内膜蛋白(p17)和衣壳蛋白(p2
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问
卡那霉素残留的测定(培养法)
天一湖医者
采用卡那霉素检测酶联免疫试剂盒分别检测供试品和标准品的吸光值(od值);根据供试品和标准品的吸光值判断供试品中卡那霉素的残留量与标准品浓度的大小:
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问
GEO2R在线分析
天一湖医者
大于0.05就没意义了,不知道为啥全部都是0 .99,但是看p的话也是有很小的有意义的.
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问
meta分析 生存资料中生存率的合并
天一湖医者
查了一些文献后觉得还是不能合并。具体可以参考一些文献,另外还有实例:有的文章提供了多因素的HR和单因素的曲线,但是根据它的KM曲线计算出的单因素HR值与文中提供的多因素HR有明显区别。
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问
Southern Blot电转法
天一湖医者
操作方法 1. 在琼脂糖凝胶上电泳分离DNA。取出凝胶,切去边缘多于部分,EB染色,在紫外灯下照相(放一标尺,可从像片中读出DNA迁移的距离)。 2. 将凝胶置于200mL变性液中,浸泡45分钟,并温和地不断振荡,使凝胶上的ds-DNA转变为ss-DNA,然后用重蒸水冲洗凝胶几次。 3. 用中和液浸泡凝胶并不断地振荡45分钟,将凝胶中和至中性。防止凝胶的碱性破坏硝酸纤维膜。 4. 取一个瓷盘,在底
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问
ROS流式检测
balalaLy
我也做过过氧化氢处理后的流式检测,也出现过这种情况,一个是处理细胞时操作不能太粗暴,另一个是过氧化氢的浓度和处理时间不能太高太久
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问
如何提高单细胞测序的成功率?
balalaLy
经过组织酶解消化产⽣的细胞碎⽚和游离RNA产⽣严重的背景⼲扰,操作过程中应尽量去除这些干扰因素
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问
低温条件下,nadh验证酶活时,340nm的nadh吸光值先下降再上升是为什么?
天一湖医者
在波长为340nm处随着NADH的氧化, NADH吸光度下降。
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问
请问做冰冻切片荧光染色,抗原修复还有必要吗?如果用的话,都用什么方法进行修复呢?
balalaLy
冰冻切片不存在这个问题,不需要抗原修复,石蜡切片的才要,用Edta或柠檬酸钠
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问
请问冰冻切片染色前是否再次用4%PFA再次固定?对结果的影响大不大?
balalaLy
我一般都是切片前新鲜组织固定,切好片后不固定,直接室温放置1小时左右过一遍pbs开始染色步骤
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问
PAGE上样量需要多少才能看到条带,我纯化蛋白上样,脱色之后什么也看不到,请问是怎么回事?
bamboopiggy
蛋白浓度在20-40ug之间,可以看到条带的,如果你看不到条带,可能是你的蛋白表达有问题
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问
细胞周期PI 染色和双染法有什么差异
balalaLy
双染是指PI和annexinV双染吧,它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的。Annexin Ⅴ(膜联蛋白 V)是一种分子量为35-36 kDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合,将Annexin V 进行荧光素FITC标记,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。而碘化丙啶(P
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问
shrna质粒转染包病毒问题
balalaLy
大多数情况下辅助质粒是可以通用的,你可以问一下构建质粒的公司可不可以送点给你
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荧光素酶报告基因检测仪器
bamboopiggy
没法用荧光分光光度仪,只能用化学发光仪或者多功能酶标仪。如果实验室没有,去问问隔壁实验室或者你们学校的实验平台有没有。
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问
茎环结构miRNA逆转录,是混合逆转录好,还是单管逆转录好?
哇哈哈哈321
做miRNA荧光定量,应该是单管逆转录好。
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如何检测细胞内的NADH
bamboopiggy
有专门的检测试剂盒,国产的都有。
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问
🔥#话题探讨#:那些不得不说的「实验室生存法则」
dxy_h0v3cvu4
我们需要的以礼待人,礼貌、真诚的打招呼,以及恰当的介绍自己。切记不能给人以强势之感,或忽视之余。当把好的印象留给老师、师兄师姐时,可以说,你已经建立起良好的人设。但前提是,你真的是这样的懂礼貌,不做作的。积极主动的干一些并不是一些坏事情。比说说,打扫下环境卫生,帮他人干些活。有些人会觉得,师兄师姐没有叫我这么做,或许此时他/她们正在考验你。但是,你也需要记住,这不是一时的显摆,需要你真正地愿意。勤
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外泌体提取?提外泌体怎样才算的好?想请教大家一下。
府宅
WB检测可以发现样品中具有外泌体的标志物,可以一定程度上排除溶酶体、蛋白聚团、支原体等情。NTA粒径分析可以反应外泌体样品中粒子的群体特征,了解其纯度
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