1 药物与血浆蛋白结合药物和血浆蛋白的结合对药物在体内的分布和转运有重要影响，因此药物蛋白结合率的测定是新药开发过程中的一项重要工作。药物与血浆蛋白结合后很难通过血管壁，故蛋白结合型药物通常没有药理活性。相反，非结合的游离型药物易于透过细胞膜，与药物代谢、排泄以及药效密切相关，具有重要的临床意义。血浆中与药物结合的蛋白主要有白蛋白（Albumin，65KDa）、脂蛋白（Lipoprotein，200~3400 KDa）、a ...

大家都知道发表论文需要有数据支持，但是很多临床大夫没有课题、没有经费、也没有数据。那是不是发不了 SCI，只能洗洗睡了呢？并不。一些公共数据库可以提供大量的临床研究数据，很多还是免费的，这就解决了没有自己的数据还想发文章的难题。那么，常见的公共数据库都有哪些呢？ 1、NHANES 数据库 图片来源：网页截图NHANES 是美国人群营养横断面调查的数据库，包含了用于评估美国成人及儿童健康与营养状况的调查研究。它的独特之处在于，除了调查研究，还结合了检查结果。 NHANES 调查包括人口统计、社会经济、饮食和健康等相关的问题，检查结果包括生理测量、实验室检测报告等。实际上 NHANES 的内容并不局限于营养学，头痛、偏头痛、动脉粥样硬化等疾病也有所涉及。NHANES 这个数据库是不需要注册的，数据可以直接从网页上下载使用网址：https://www.cdc.gov/nchs/nhanes/ 2、CHNS 数据库 图片来源：网页截图CHNS 是中国的健康与营养调查，由美国北卡罗来纳大学人口中心与中国的预防科学医学院联合进行的大规模的社会健康调查。与 NHANES 不同，它就是单纯的调查，没有

完成投稿后，早期可能会有编辑联系格式更改事宜，然后就进入了漫长的等待。有一种情况，经过几天乃至数周后，收到了稿件转投建议（Journal Transfer Recommended）或因与期刊 Scope 不契合而直接被拒稿。随着转投他刊，意味着文章格式、图标部署和行文思路等都将进行一定程度的修改，这一过程浪费了许多时间。因此，可以在正式 Submission 之前，给目标期刊写封邮件，进行一次 Pre-submission enquiry。在初步调查并选定目标期刊后，可以通过邮件询问的形式（个别期刊或特刊也会开放相应的系统或由组稿编辑直接负责，如 Nature、NEJM 和 Frontiers 系列期刊等）来了解期刊是否对这篇论文感兴趣。与正式投稿不同，Pre-submission enquiry 可以有针对性地写给多家心仪期刊，根据答复情况再进行正式投稿。这种咨询对自己较为熟悉的、经常投稿的领域或期刊帮助不大，而对于交叉学科、新接触的领域、新的研究技术、非约稿的综述、期刊强制要求（如 NEJM 的某些板块）和其他拿不准的情况大有裨益。 一、主要内容一封 Pre-submission

大家都知道广读文献十分重要，但是事实上，做好一份文献笔记也同样重要。很多时候，没有做过笔记的文献就像过眼云烟一样，读了一段时间之后就会被忘得一干二净。而当你想要引用其中的观点时，却又怎么都找不着是在哪篇文章哪个段落里看到过这个观点了。这个时候，一篇好的文献笔记就显得十分重要，它可以帮助我们快速找到曾经阅读过的文献，帮助我们迅速重拾研究思路。与此同时，在做文献笔记的过程之中我们还可以更好地理解与吃透文献。那么，说到底，我们该怎么去做文献笔记呢？从整体上来说，一篇文献笔记基本可以分为以下几个部分：1. 索引关键词主要包括研究关键词、文献类型、阅读原因等。2. 文献基本资料主要包括文献标题、作者、刊物及其影响因子、文章发表时间等。3. 文献主要内容主要包括研究目的、研究方法、研究结果、研究结论等。4. 阅读想法记录主要包括文章中有哪些可以借鉴/引申的内容，有哪些精彩论点，可以跟进那些参考文献等。下面，以《新英格兰医学杂志》（NEJM）上的一篇文章「A Randomized Trial of Closed-Loop Control in Children with Type 1 Diabete

无论是毕业答辩，还是研究设计，样本量的问题经常困扰着科研小白。样本量取多少合适？样本量是不是越大越好？临床上并没有那么多的样本怎么办？这些都是常见的临床研究疑惑。而样本量在计算的过程中涉及很多统计量、复杂的公式和专业的软件，让科研初学者望而却步。今天，给大家分享一个简单的样本量计算工具，助力科研设计（网址：http://powerandsamplesize.com/），网站中还提供了公式讲解和 R 语言代码等有关信息。进入网站后，可以通过点击红框内按钮直接进入样本量计算界面：图源：网站截图根据研究类型进入选定的计算模式后可发现界面可分为参数输入与结果输出部分、快速运算图、运算模式选择、计算公式讲解和 R 语言代码展示等若干区域。图源：网站截图计算样本量之前首先要明确研究类型，明确了研究类型以后就可以通过已发表的文献或前期预试验来确定关键结局指标、不同组别的人口学特征和试验药物疗效等相关信息。接下来，以等效性随机对照试验为例，简要讲解 powerandsamplesize.com 的操作方法： 例 1：某平行设计的随机对照试验拟探讨试验药物是否能降低收缩压。估计安慰剂对照组收缩压的平均值

一篇文章从 idea 的构思一直到终稿的完成，犹如怀胎十月，历经重重关卡，足以磨炼一个人的身心。然而，文章写完并不意味着结束，相反这是一个全新的开始。此时，你将进行可能不知道多少次的投稿修炼过程。这其中的酸爽可能只有体会过的人才能品味到！每年 6 月下旬 JCR 就公布了影响因子 (IF)，IF 的起起伏伏就犹如中国 A 股一般，牵动着无数科研人员的心，又像是达尔摩斯剑一般让人害怕。今年最新的 IF 已经公布一个月，小编正好手上有一篇文章需要投稿，于是乎研究了一番肿瘤领域 3 分左右的期刊，从中挑了一些热门期刊和个人觉得不错的杂志分享给各位朋友。首先从 web of science 上下载了今年 JCR 发布的官方影响因子，粗略浏览了一下肿瘤领域杂志有 229 本杂志之多，3 分的有 50 本，数量充足，可选性强。小编按 IF 高低进行介绍，前后顺序不代表喜好！ 1. International journal of oncology官网如下：https://www.spandidos-publications.com/ijo2018 年该期刊的 IF : 3.571, 是希腊出版商

又到了一年一度的毕业季，几家欢喜几家愁，有些同学手里文章一大把，有些同学却愁毕业直跺脚。那么有没有又快又省事的杂志推荐呢？别说，还真有。医药领域有一家杂志社值得了解一下：Dove（德孚）出版社。 英语网站：https://www.dovepress.com/index.php中文网站：http://www.dovepress.com.cn/德孚出版社对国人友好，一审时长和接收到出版时长在 20 天左右，拒稿率 65% 左右，美中不足的就是旗下期刊的分区多在中科院 3、4 区，影响因子多在 2-4 分，但用于毕业应该足够了。 一、关于德孚出版社德孚医药出版社成立于 2003 年，是一家英国公司，是 Taylor & Francis Group 的一部分，专门从事开放获取同行评议（Open Access peer-reviewed）期刊的出版业务，主要为医药领域。其出版的刊物中有 23 本被 SCI 数据库收录，部分刊物被其他数据库如 PubMed、EMBASE、Scopus 等收录，在投稿时需要甄别。德孚医药出版社网站提供中文版，也开通了微信公众号，可以直接查询稿件状态。 二、德

做完实验/试验，写好文章，下一步就该选刊投稿了。数千份 SCI 杂志，有的人一投即中，即使被拒也能迅速找到下家；有的人却屡投稿屡被拒，选个杂志耽搁大半年！其实，选刊是非常需要技巧的，今天，笔者就给大家分享一些小技巧。 一、对自己工作的恰当认识选刊第一步，心里要要清楚自己的实验/试验设计及工作量大概能发什么样的期刊。自己判断不了可以通过和有经验的人交流，或自己多看文献来判断。否则明知道是 3 分文章的工作量，去投 5 分，10 分的杂志，基本就是浪费时间。因而，认清楚现实再选择契合研究领域，和自己水平相当的期刊很重要。 二、选刊投稿工具有了基本的定位后，就可以借助一些高效工具来缓解自己的工作压力。这里主要介绍两个网站。1、Jane网址：jane.biosemantics.org图片来源：网站截图Jane 的全称是 Journal\Author Name Estimator。从 Welcome to Jane 的介绍我们可以看到它的定位很清晰，目的就是帮助作者选刊，并且还可以很方便地找到与自己类似的文章，了解他们的观点，以便引用到自己的论文中。左上角可以选择输入你自己文章的关键词，标题或摘

学术论文是科学研究成果的主要载体和传播媒介。学术论文的数量越来越多，而研究者的精力非常有限。因此对学术期刊进行评价，可以在一定程度上为读者提供参考，并帮助科研机构进行成果评价。目前，学术界对学术期刊质量通常采用期刊分区和影响因子进行评价。期刊的影响因子是什么、期刊是如何分区的、JCR 分区和中科院分区有什么区别等问题往往困扰着许多刚刚步入科研领域的同学。因此，本文将谈谈学术论文的影响因子和分区问题。 一、影响因子什么是影响因子？影响因子（Impact Factor），简称 IF，指的是某一期刊所发表文章在特定年份或时期的平均被引次数。影响因子是汤森路透（Thomson Reuters）出品的期刊引证报告（Journal Citation Reports，JCR）中的一项数据。IF 是衡量学术期刊影响力的一项重要指标。通常，期刊的影响因子越大，表明期刊的学术影响力和作用也越大。如何计算影响因子？IF 的计算通常采用过去两年发表在该期刊上的学术论文被引总数除以发表文章总数获得。以 2020 年期刊为例，IF 具体计算公式为：为了使期刊的分区相对稳定，减少影响因子上下波动带来的影响。中科院也

时光匆匆，一年又一年，毕业的脚步近了，又到了毕业生们「不想写论文」的季节。其实大家重点关注的问题无外乎两个：如何写好和如何写快。那么读一读接下来的写作攻略，也许会对在论文写作阶段的你们有所帮助。写论文的第一步：你需要搞清楚一篇合格毕业论文的结构是什么。 毕业论文的框架其实很简单，通常分为 5-6 个章节。当然每个学校的要求可能有些差异，但万变不离其宗。①论文题目；②中（英）文摘要；③目录；④正文（包括引言/绪论、文献综述、具体实验方法及结果的分析，总结和展望等）；⑤参考文献等下面说一说各部分的写作： 一、摘要摘要是论文整体的一个精炼。我个人的习惯是从引言和结论中挑出主要目的和结论。从方法和结果部分挑出重点句和重要的结果。随后将找出的句子和要点依据引言、方法、结果、结论的顺序组织成一段。这样做的目的是使读者在不阅读全文的前提下，就可以获得主要信息。Tips：摘要一般不引用文献；有用到缩略语时，第一次一定要标明全称；尽量使用简单句，表达要求简单完整，避免使用口语；切忌直接用翻译软件完成英文摘要，即使使用软件辅助也一定记住要自己手动修改润色。图片来源：文献截图 二、目录虽然每个学科专业的标题

作为医学科研工作者，撰写学术论文和向期刊投稿是及时的将自己的科学发现与世界上其他学者分享的重要方式。一篇 SCI 学术论文在完成稿件撰写后，往往需要长时间的审稿。而作为学术「守门员」的期刊编辑和同行评审专家需要对稿件进行多轮审稿，需要很长时间来完成这一工作。对于刚进入科研领域的同学来说，往往搞不清楚稿件投稿后的各个状态具体的含义。基于此，笔者拟通过本文来谈一谈稿件在审稿各个状态的含义及具体流程。 一、常见审稿状态1. Manuscript Submitted（Submitted to journal）：表示论文已经投稿成功。接下来由期刊工作人员检查论文格式排版、重复率是否符合要求，符合要求的文章会分配给期刊编辑进行处理。2. Awaiting admin processing：意为等待负责的编辑处理。在编辑审稿前，助手负责审查稿件是否齐全，不齐全的话则立即要求作者按要求补充相关材料。许多期刊会在系统显示 Manuscript Submitted 时完成该步骤。3. Editor Invited： 这个阶段不是所有的期刊都有，这个状态是表示论文已经转给编辑，正在等待编辑接受。4. Wit

外泌体（Exosomes）是细胞分泌到胞外的一种囊泡，大小为 30-150 nm，携带了各种核酸、蛋白质和脂类等物质，可以在不同细胞间进行传递和交流，从而影响受体细胞的生物学功能。外泌体在大小和功能上与合成的纳米颗粒类似，但作为天然内源性载体，具有免疫原性低、毒性低、稳定性高、渗透性好等优势，故可能成为更有应用前景的药物递送载体。目前，外泌体已经成功运载基因类药物、抗癌药物和抗炎症药物等其他类型药物。近年来，外泌体作为基因载体引起了基因治疗研究者的广泛关注。与传统的病毒或非病毒载体相比，外泌体作为基因载体其优势包括以下几点：1.安全：从患者体内获取的外泌体，经载入基因后，再注入患者体内几乎不会引起免疫反应，更加安全；2.保护性强：外泌体粒径较小，可以逃过网状内皮系统的捕捉，有效保护承载的基因；3.运载效率高：外泌体可以通过与受体细胞膜融合的方式，将基因类药物释放到细胞质中。近期，和元生物研发团队展示了他们在外泌体载药上的研发进展，分别用电转法和共孵育法做了 miRNA 和 siRNA 两部分装载的探索。根据数据结果显示，相比共孵育法，电转法能更有效地将 miRNA 和 siRNA 这些

结直肠癌（CRC）是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，具有很高的转移和复发风险。由于传统疗法存在毒性、不耐受等缺点，临床结果不能令人满意。因此，迫切需要识别出敏感的CRC 标记物，作为早期检测和治疗的新靶点。近年来，外泌体在癌症中的作用越来越受到关注。在本篇文章中，上海同济大学医学院李冬教授和孙祖俊教授等[1]首次揭示了癌症来源的外泌体 circPACRGL 在 CRC 增殖和转移中起致癌作用，并为 CRC 治疗提供了有价值的标志物。研究结果如下： 1.CRC 来源的外泌体能促进 CRC 的增殖、迁移和侵袭作者从两种 CRC 细胞系（HCT116和SW480）上清中分别分离获得外泌体，经过透射电镜、NTA 和 WB 鉴定后，确认已分离出外泌体。随后，作者用外泌体处理对应的 CRC 细胞，发现外泌体能显著促进 CRC 细胞增殖、迁移和侵袭，并减少凋亡。WB 结果也显示，外泌体能提升 CRC 细胞中 BCL-2、 N-cadherin、Vimentin、MMP9 蛋白水平，和降低 E-cadherin、Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9 蛋白水平。裸鼠成瘤的结

外泌体（Exosomes）是细胞分泌到胞外的一种囊泡，大小为 30-150 nm，携带了各种核酸、蛋白质和脂类等物质，可以在不同细胞间进行传递和交流，从而影响受体细胞的生物学功能。肿瘤细胞来源的外泌体不仅能帮助肿瘤细胞自身发生侵袭和转移，也能促进肿瘤微环境其他细胞的状态发生改变。外泌体在肿瘤中起的作用若要深入研究，这就需要我们拿到更多的肿瘤来源的外泌体。目前肿瘤方向的研究多使用肿瘤细胞的培养上清来提取外泌体，但是现在我们可以直接利用肿瘤组织来提取外泌体，一方面减少了大量体外培养细胞的工作，另一方面利用肿瘤组织提取得到的外泌体，可能更接近于生理状态下的外泌体，也有利于研究外泌体的功能。重点来了！那如何从肿瘤组织中分离提取外泌体呢，效果又如何？下面和大家分享我们自己从肿瘤组织中提取外泌体的效果，供大家参考： 一、采用消化+滤筛过滤+超离法从肿瘤组织中分离外泌体：将肿瘤组织切成小块，加入胶原酶孵育，再经过滤筛过滤，随后进行一系列的差速超速离心过程，包括除杂、超离等，最终用 PBS 重悬外泌体，用重悬后的外泌体进行接下来的透射电镜（TEM）、纳米粒径跟踪分析（NTA）和 WB marker 鉴

外泌体（Exosomes）作为细胞分泌到胞外的一种囊泡，参与不同细胞间 DNA、RNA、蛋白质等分子的传递，起到了细胞间的通讯作用。近些年，很多学者都在探索外泌体在各个研究领域中扮演的角色和功能，但是由于外泌体的不易获得性，使得很多方向的外泌体研究举步维艰。在神经系统中，由于脑脊液难以得到，要想获得脑部直接来源的外泌体则难度较大，所以从脑组织中分离外泌体对于神经系统研究人员迫在眉睫。且目前外泌体的分离方法很多只适用于液体样本，不太适合直接分离组织。所以我们一直立足文献[1]并积极优化从脑组织中分离外泌体的方法。本文主要和大家分享我们从小鼠脑组织中分离外泌体的效果，供大家参考： 一、采用消化+超离法从脑组织中分离外泌体：将脑组织剪成薄片，放入离心管中加上消化液进行消化，经水浴、反复轻轻上下颠倒，再用移液枪间断缓慢吹吸至消化结束。随后加入培养基于消化液中，混匀，置于冰上。再进行一系列的差速超速离心过程，包括除杂、滤膜过滤、超离等。最后用 PBS 重悬外泌体，用重悬后的外泌体进行下面的透射电镜（TEM）、纳米粒径跟踪分子（NTA）和 marker WB 鉴定。 二、TEM 鉴定外泌体外观：将

外泌体（Exosomes）是一种细胞分泌到胞外的囊泡，其大小为 30-150 nm，呈茶托状结构，内部含有核酸（DNA 和 RNA）、蛋白质、脂质等多种分子。外泌体参与细胞间的沟通，可以将其装载的分子传递给不同细胞，改变受体细胞内部一些分子的含量，从而影响受体细胞的状态和功能。图一 图片来自于丁香园随着我们对外泌体深入的了解，外泌体在液体活检中的诊断价值逐渐显现。谈到液体活检，我们最先想到的是循环肿瘤细胞（CTC）和循环肿瘤 DNA（ctDNA），而外泌体作为一种新的液体活检方式，正在受到很多人的关注。2019年，FDA 授予 Bio-Techne 公司的诊断前列腺癌的液体活检测试 ExoDx Prostate IntelliScore（EPI）突破性医疗器械认定（breakthrough device）。这是第一个基于外泌体（exosome）的液体活检测试获得这一认定，具有重要的里程碑意义。下面我们将从外泌体的各个组分来解析外泌体在液体活检中的意义： 一、以外泌体 miRNA 为标志物：山东省肿瘤医院谢丽和宋现让课题组合作发表论文[1]，阐述了来自结肠直肠癌（CRC）患者和健康人血清

外泌体（Exosomes）作为当前科研界的热度话题，很多人觉得它很神秘，不知道它在疾病治疗或发生、发展中扮演什么样的角色，今天我们跟大家一起基于文献来探讨一下外泌体具有的功能。先回顾一下外泌体的基础知识。外泌体是细胞分泌到胞外的一种囊泡（Extracellular Vesicles，EVs），其大小为 30-150 nm，具有双层膜结构和茶托状形态，含有丰富的内含物（包括核酸、蛋白和脂质等），参与细胞间的分子传递。所有的细胞都能分泌外泌体，但是不同细胞分泌的外泌体不管在数量上还是在内含物中都具有很大的差异性，这也决定了每种外泌体所行使的功能不一样。图一 外泌体透射电镜图和 NTA 图 一、肿瘤细胞来源外泌体功能解析：海军军医大学王红阳课题组在《Nature Communications》上发表文章[1]，揭示了肝癌细胞分泌的外泌体可促进正常成纤维细胞向癌症相关成纤维细胞（CAFs）转化，其中起重要作用的是外泌体中的 miR-1247-3p。CAFs 能分泌促炎因子，并促进肝癌的发展和向肺部的转移。图二 肝癌细胞分泌的外泌体增加成纤维细胞迁移图三 肝癌细胞分泌的外泌体促进肺部转移大连医科

最近科研界什么比较流行？外泌体（Exosomes）是当之无愧的热点话题。不论在肿瘤领域、神经科学领域还是代谢领域，都有大量的外泌体相关文章发表，以探究外泌体的功能和机制。再梳理一下外泌体的基本知识。外泌体是一类大小为 30-150 nm、呈茶托状的由脂质双层膜包裹的细胞外囊泡，广泛存在于细胞培养上清及各种体液中，包括血液、淋巴液、唾液、尿液、卵泡液、精液、心包液、乳汁等。外泌体内含有多种蛋白质（如 TSG101、HSP70 等）、核酸（DNA、RNA）和脂质（胆固醇、鞘磷脂等），这些内容物因释放外泌体的细胞不同而有比较大的差异。外泌体首先需要从样本中分离出来，目前比较公认的分离方法是超速离心法，再通过透射电镜（TEM）、纳米粒径跟踪分析（NTA）、Western Blot 等进行鉴定。获得外泌体后，对外泌体进行标记，观察外泌体被摄取情况，再进一步探索外泌体的功能，如组织修复、肿瘤转移、代谢重建等。下面我们仔细聊一聊外泌体标记的方法。 一、亲脂性染料标记：目前已发表的外泌体文章中，外泌体大多使用亲脂性染料进行标记，体内和体外都有较多应用。亲脂性染料主要分为两大类，第一类是 PKH67（绿

一、什么是外泌体？外泌体（Exosomes）是大小为 30-150 nm、呈茶托状的细胞外囊泡（Extracellular vesicles, EVs），广泛存在于细胞培养上清及各种体液中，包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等。几乎所有细胞都可以分泌外泌体，但是外泌体来源不同，其内部装载的 RNA、蛋白质、脂类等重要物质在数量和丰度上有很大差异。 二、外泌体的作用和功能外泌体可通过传递信息影响目标细胞的功能，激活细胞信号通路，在免疫、凝血、肿瘤等生理病理过程中发挥作用。外泌体可以作为临床诊断中的生物标志物或疾病治疗的靶点，同时也可以作为药物载体，参与神经疾病和癌症等多种疾病的病理过程。 三、关键步骤 — 外泌体分离外泌体的分离纯度对外泌体的功能研究非常重要，但是外泌体的分离一直是困扰外泌体研究人员的一个难题。虽然分离外泌体方法有很多种，包括差速超速离心法（超离法）、超滤法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、试剂盒法等。但目前文献中常用的分离外泌体的方法主要是超离法和试剂盒法，那这两种方法研究人员该如何选择呢？为了解决大家的疑惑，我们专门做了对比实验进行阐述。 四、超速离心法与试剂盒法比

最近一段时间正是国自然标书撰写进入最后的冲刺阶段，相信很多科研工作者们都已经拟好内容，只差润色了。但是不知道这两年的国自然一线明星外泌体，大家的内容里都靠上了没？如果想靠但还没有靠上的，需要抓紧时间了啊，还剩下最后的补实验基础的时间。下面我为大家将外泌体的知识再梳理一遍： 在说外泌体之前，我们先介绍一下细胞外囊泡（Extracellular Vesicles， EVs）。细胞外囊泡是细胞以多种形式分泌到细胞外的各种囊泡：外泌体（Exosomes）直径为 30-150 nm，以内吞的形式释放到细胞外；微囊泡（Microvesicles）直径为 100-1000 nm，以出芽的形式释放到细胞外；凋亡小体（Apoptotic body）直径为 50-2000 nm，由凋亡细胞产生。由于各种胞外囊泡的大小可能有交叉，所以要想通过分离手段得到某种纯化的特定囊泡是很难实现的。图一 胞外囊泡的分泌 （图片来源于文献）外泌体携带有细胞来源相关的多种蛋白质、脂类和核酸，其中蛋白质包括跨膜蛋白、信号转导蛋白、细胞支架蛋白、酶等，现在很多文献会选择其中的几种膜蛋白和膜内蛋白作为外泌体的鉴定标志物，核酸包括