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共聚交显微镜相关程序安装及操作(二)

接上一期《共聚交显微镜相关程序安装及操作(一)》,本期继续讨论《共聚交显微镜相关程序安装及操作》,主要内容涉及背景校正,对比度和强度的调整,添加标尺和其他标记等。背景校正olympus FV1000提供了三种背景校正方式:第一种:是选定一个ROI(region of interest)以后,以ROI的荧光平均值作为背景,然后软件会自动减去背景。第二种:是选择一张没有阳性表达的部位作为背景图片,然后进行扣除,第三种:是--我也忘记了。 ...

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中国急诊医师协会:特殊情况紧急输血专家共识

起草小组:于学忠,郭树彬,杜铁宽,白连军,王仲,张茂通讯作者:郭树彬(北京协和医院急诊科)(中国急救医学 2013, 33(6))为挽救生命、积极救治患者,在受到客观条件限制常规抢救治疗措施无法实施,法律尚无明确规定的特殊情况下,允许医生为挽救患者生命按照下列步骤采取紧急输血措施。1 血型不明时紧急输注O型红细胞处理流程1.1适用情况患者必须同时满足以下所有条件方可启动此流程:1.1.1 ABO血型难以确定(如:ABO血型系统的亚型表型, ...

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呼吸道感染快速床旁诊断的进展和前景

2014 年 11月,Lancet Infect Dis上发表了“新出现的呼吸道感染”系列文章,共5 篇,其中第4篇主要描述了现有的呼吸道感染病毒和细菌病原体的诊断试验,以及有望提高床旁快速诊断质量、速度和可操作性的技术发展。现将主要内容编译归纳如下。呼吸道感染由多种病毒和细菌病原体引起,是全球发病和死亡的第二大常见病因。在全球疾病负担的排名中,下呼吸道感染仅次于缺血性心脏病位居第二。欧洲的监测报告显示,由耐药细菌所致的感染数量显 ...

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DNA SMART技术让ChIPSeq研究更轻松

Clontech是cDNA合成技术的引领者,近年来SMART(Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)技术被公认为是微量RNA和单细胞RNA-seq的行业金标准。现在创新的DNA SMART技术将模板转换机制的优势拓展到了DNA分析,利用DNA SMART ChIP-Seq Kit无需接头连接即可构建ChIP测序文库,极大地缩短了实验进程。科学技术的发展有时需要突破实验技术的挑战,如何从染色质免疫共 ...

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SDS-PAGE失败实例及分析第三期 前端指示剂缺失

接上一期 SDS-PAGE失败实例及分析 之 条带过浅,本期就来讲讲由于前端指示剂缺失,而在产生的问题部分前端指示剂——例1为了装置凝胶花了不少功夫,如果停止电泳太晚就太可惜了。因为如果部分前端的指示剂已经跑出凝胶的话就不能确定各个条带相对应的迁移率了。这块胶有一个内部的刻度——也就是跑胶时带上了分子量标准(Marker)。由于条带较平直,任意条带都可以作为参考来确定跑胶的迁移率。前端指示剂缺失——例2这块胶跑胶时间过长以至 ...

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实验室用水相关常识

资料占有数和资料利用率成反比,是我们大多数人的一个坏习惯(包括偶自己)。近期论坛不少帖子都对实验室里的所用水感到困惑。我自己最大的一个体会是层析试验中缓冲液的配制,所用的水对离子交换层析和疏水层析的效果有所影响。为此, 特地摘抄一段大家都知道(但未仔细学习)的内容,以共同来温习实验室用水的相关常识。问题:实验室中常见规格的水及使用注意点?1、自来水(Tap water)Tap water is usually of uncontrolled q ...

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质粒提取之菜鸟问题

1.溶液I—溶菌液:溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求 ...

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lipo2000转染试剂 资深用户操作经验总结

lipo2000是各大实验室,科学院,技术实验室最常用的转染试剂,小小的试剂,价格不菲,经常听到客户说严格按照说明书来操作,还会出现这样或者那样的问题。客户经常抱怨东西贵,还做不出好效果。1. Lipo2000的保存:4℃保存和运输2. Lipo2000的活性:由于Lipo2000是生物蛋白,在4℃保存和运输,所以就算是同一个批号的Lipo2000,只有在刚出厂分装时活性才是相同的。经过供应商的保存、运输(运输的温度控制各不 ...

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SDS-PAGE失败实例及分析第二期 条带过浅

接上一期:一、症状——条纹拖尾条纹拖尾——例1这块胶就非常难看了。原因在于分离胶倒完之后没有用水或者异丙醇压胶,导致分离叫上缘非常粗燥,就像你看到的一样。当样品堆积在凹凸不平的分界线时,位于凹陷部位的蛋白由于不能适当的浓缩就析出来了。然后再跑胶过程中逐渐溶解造成了条纹拖尾症状。二、症状——条带过浅条带过浅——例1这个问题可能是由于加样孔成形不佳和/或凝胶加样不认真所致。背景较深而且不均一说明蛋白可能存在于电泳缓冲液中 ...

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尿微量白蛋白肌酐比值(ACR)检测的临床意义

一,尿微量白蛋白肌酐比值(ACR)临床参考范围ACR:男参考区间:0-25女参考区间:0-30二,尿微量白蛋白肌酐比值(ACR)在临床的应用:尿微量白蛋白(MA)是诊断糖尿病早期肾功能损伤的重要参考指标。糖尿病肾病早期尿常规查尿蛋白常为阴性,因此,糖尿病患者必需定期进行尿微量白蛋白测。此外,尿MA是诊断慢性肾脏病的重要指标,而且是心血管疾病发生,肾脏病预后及死亡的独立预测因子。美国肾脏病预后及生存质量(K/DOQI)指南 ...

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BNP(脑钠肽)的临床意义

BNP-B型脑钠肽,主要来源于心室。它的含量与心室的压力,呼吸困难的程激素调节系统的状况相关。心室的体积和压力增高可导致血浆内BNP的升高,升高的程度与心室扩张和压力超负荷成正比可敏感和特异性反映左心室功能的变化。用BNP协助诊断心力衰竭,判断病情的严重程度和预后。BNP是从猪脑内分离纯化的一种利钠肽,具有强大的利钠,利尿,扩血管,降低血压的作用。BNP具有抑制血管平滑肌细胞和成纤维细胞增殖的作用,在血管再重塑 ...

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ChIP 新手心得

最近有不少战友在做ChIP实验,希望我的一点经验对大家有帮助(本贴不谈实验步骤,最后我会附件一份说明书,有详细步骤,另外建议像我一样的新手用试剂盒,避免不必要的麻烦)一、原理转录从基因的启动子区开始,由一系列的转录因子结合到基因的启动子区,通用转录因子结合在基本启动子区起始转录,而这个过程对基因的转录是必需的,但不是充分的,通常需要一些特异的转录因子结合在上游调节序列,使基因特异表达并维持的合适水平,ChIP主 ...

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SDS-PAGE失败实例及分析第一期

SDS-PAGE “hall of shame”如果你能够非常熟练的制备一块完美的凝胶,甚至对它进行改进都十分困难,那么你真的应该值得庆幸!但是如果你不能达到这个水平也不要灰心。所有的优秀的科学家都是从失败中成长起来的,事实上,如果不出错我们就很难学到更多的东西!(我的western blot技术也是从上百次的失败中成熟起来的,这中间我就学到了很多,相对于PCR,我第一次就成功的做出了RT-PCR和重叠延伸PCR,但是对于PC ...

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输血的相关问题

一、输血的原则是同型输血。紧急情况下若无同型血时,可按下列原则:(1)O型输给A、B型,AB型可接受A、B、O型血。(2)必须少量(<400mL)、缓慢进行,同时立即联系同型血源。   二、输血前必须进行交叉配血试验,如果交叉配血试验的两侧都没有凝集反应,即为配血相合,可以进行输血;如果主侧有凝集反应,则为配血不合,不能输血;如果主侧不起凝集反应,而侧有凝集反应,只能在应急情况下输血,只能少量缓地进行输血,并密切观察,如发生输血反应,应 ...

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术中自体血液回输应用

作者:陈绍洋 朱萧玲 张英民 侯丽宏 熊利泽 王强关键词:输血,自体;外科手术;麻醉摘要:目的探讨术中自体血液回输的安全性和效果方法选择56例出血较多的患者,应用自体-2000型血液回输机,收集手术野和体腔内的出血、积血,处理后回输给患者自身结果每例回收血量(1136±352)L,回输浓缩血细胞(621±173)L,84%患者术中、术后未再输库血;术后测的各项指标除谷丙转氨酶(AST)变化不明显,其他的变化趋势均与输库血的对照组相仿结论采用 ...

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临床输血小知识

(一)为何全血并不全?1血液离开血循环,发生“保存损害”;2保存液是针对红细胞设计的,只对红细胞有保存作用;3血小板需要在22±2℃振荡条件下保存,4±2℃保存有害;4白细胞中的粒细胞是短命细胞,很难保存;5凝血因子Ⅷ和Ⅴ不稳定,保存1-3天活性丧失50%。(二)为何现在不提倡输全血,而提倡成分输血?1全血中除红细胞外,其余成分浓度低,有的已丧失功能或活性,起不到治疗作用;2全血中主要有效成分是红细胞,其疗效与红细胞相似,而不良 ...

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医疗机构临床用血管理办法

第一条根据《中华人民共和国献血法》第十六条规定,制定本方法。第二条本办法所称临床用血包括使用全血和成份血。医疗机构不得使用原料血浆,除批准的科研项目外,不得直接使用脐血。第三条县级以上人民政府卫生行政部门负责对所辖医疗机构临床用血的监督管理。第四条医疗机构临床用血应当遵照合理、科学的原则,制定用血计划,不得浪费和滥用血液。医疗机构临床用血,由县级以上人民政府卫生行政部门指定的血站供给。医疗机构开展的患者自身储血、 ...

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中华人民共和国献血法

中华人民共和国献血法(1997年12月29日第八届全国人民代表大会常务委员会第二十九次会议通过)第一条为保证医疗临床用血需要和安全,保障献血者和用血者身体健康,发扬人道主义精神,促进社会主义物质文明和精神文明建设,制定本法。第二条国家实行无偿献血制度。国家提倡十八周岁至五十五周岁的健康公民自愿献血。第三条方各级人民政府领导本行政区域内的献血工作,统一规划并负责组织、协调有关部门共同做好献血工作。第四条县级以上 ...

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输血前五项指标检测结果分析

输血所导致的传染病发生,在我国近十多年来是很受重视的一个问题,全国各地由于输血后而感染传染病的病人已不少,病人与医院(血站)纠纷并不少见,近十年来,由于我国加强了对血源的管理以及对献血员与病人进行了乙型肝炎病毒HIV、HCV人类免疫病毒进行了筛查,同时重重打击了黑市场的献血点,而使输血传播病人的病毒感染率有了明显的下降。为了有效地控制医源性感染和有效地避免经输血传播疾病的发生,我科遵照卫生部有关输血和检验方面 ...

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血液制品管理条例

第一章总则第一条为了加强血液制品管理,预防和控制经血液途径传播疾病,保证血液制品的质量,根据药品管理法和传染病防治法,制定本条例。第二条本条例适用于在中华人民共和国境内从事原料血浆的采集、供应以及血液制品的生产、经营活动。第三条国务院卫生行政部门对全国的原料血浆的采集、供应和血液制品的生产、经营活动实施监督管理。县级以上方各级人民政府卫生行政部门对本行政区域内的原料血浆的采集、供应和和血液制品的生产、经营活动, ...

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