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lipo 2000 转染试剂,资深经验总结

丁香实验

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lipo2000 是各大实验室,科学院,技术实验室最常用的转染试剂,小小的试剂,价格不菲,经常听到客户说严格按照说明书来操作,还会出现这样或者那样的问题。今天给大家整理了 lipo2000 使用以来的经验技巧,请大家收好!

一、Lipo 2000 的保存

4℃ 保存和运输

二、Lipo2000 的活性

由于 Lipo2000 是生物蛋白,在 4℃ 保存和运输,所以就算是同一个批号的 Lipo2000,只有在刚出厂分装时活性才是相同的。经过供应商的保存、运输(运输的温度控制各不相同),其活性将有细微的变化。

三、Lipo2000 的优化

1、由于每一管 Lipo2000 的活性都不太相同,其实就算是同一管,使用的时间长了,后期的活性跟刚开始用时也不太一样,所以在拿到一管新的 Lipo2000 时,一定要做一下活性优化。
2、如果一直使用 Lipo2000 做实验,优化的步骤可以简化:假设之前转化时每孔一直用 4ul Lipo2000,那么优化的步骤可以简化为只用 5 个孔,每个孔中 Lipo2000 用量分别为 3ul, 3.5ul, 4ul, 4.5ul, 5ul,其他条件不变,看哪个 Lipo2000 的用量结果最好,接下来的实验就用优化的用量。

四、Lipo2000的使用

使用前将整管的 Lipo2000混匀,分装,最好分成 100ul /管;
实验前,将分装好的 100ul Lipo2000 和质粒 DNA(或 RNA )放到实验台上室温平衡,不需要冰上保存;
将 Opti-MEM 培养基放到水浴锅中 37℃ 平衡;
按照说明书进行转染,注意控制好每一步操作的时间;
切记并不是 Lipo2000 的用量越多越好,实际上,Lipo2000 加多了,毒性会增加,细胞会死亡,转化效率会大幅降低。

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