mirror122 大家好，下面这篇文章我在PUBMED上找不到全文，大家谁能找到全文麻烦传给我吧，非常感谢！Blood. 2011 Jul 14;118(2):413-5. Epub 2011 May 20.CirculatingmicroRNAs let-7a and miR-16 predict progression-free survival and overall survival in patients with myelodysplastic syndrome.zzjjzhoujing ...
myskite 实验证实，某个miRNA促进细胞凋亡（casp3升高，bcl2降低）。我看pubmed上这方面的文献，都是，miRNA抑制了凋亡通路的某个基因，导致促进或抑制凋亡。可是，我做的这个miRNA，经过预测，并不调控凋亡通路上的任何一个基因。我该怎么办呢？zhangshukui 参考下这篇文章MiR-25 regulates apoptosis by targeting Bim in human ovarian cancer。还有就是你选择的是m ...
能nca 要菌摇了一整夜早上才发现摇床培养箱的温度不对，本来应该是37度，可是昨天晚上，昨天晚上做实验太忙了，只在28度呆了一整夜，早上看菌都没有很大的变化，怎么办啊？我现在把温度该过来，正在37度接着摇菌呢。能nca 十分的着急，希望大家快点来帮忙ylong12 取菌 重新摇 28度摇的菌活性不好 后即实验很难进行能nca 谢谢了本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄 ...
bingo816 一篇关于miRNA的文章值得分享bingo816 有什么见解的 一定留言啊龍崎 下来看看本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming
英实 illidancui 你做个温度梯度试试英实 谢谢哦本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming
hanrui1009 各位同仁：对于大于5KB的片段如何选择合适的载体进行克隆？为什么？什么公司的什么产品尽可能详细！fengye_liu 一般的T VECTOR作为克隆载体是可以胜任的！hanrui1009 是吗？可是很多前辈都说 不好做啊！成功率不高啊！纠结啊！ylong12 hanrui1009 wrote:各位同仁：对于大于5KB的片段如何选择合适的载体进行克隆？为什么？什么公司的什么产品尽可能详细！克隆 好像大都用T vector 一般大于 ...
woshizhixiaofei 如题，谢谢大家song333 cut the part containing the plasmid, put in water (small volume if possible), then transformation using the water (containing plasmid).fengye_liu cut the part containing the plasmid, put in water (small volume if possible), then transformation using ...
iiyuan 有人用invitrogen的trizol 提取哺乳动物组织蛋白吗？效果如何？O(∩_∩)O谢谢 回复wangke80 这个问题我刚好前段时间检索过，你可以参见两个丁香园的帖子：1：http://www.dxy.cn/bbs/thread/4474660#44746602：http://www.dxy.cn/bbs/thread/6296746#6296746另外的我其它地方查到的内容摘抄如下：在用酒精沉淀出DNA（DNA抽提中的 ...
霍一刀hxs 在 一篇论文的实验步骤中，其buffer添加了P.I.，我不知其为哪种试剂的简称。希望有高手可以指点。急！谢谢！大鹏鸟 什么实验？说清楚点好帮你啊natprod 是做细胞周期或凋亡试验的吗，propidium iodide (PI) 染DNA用的。xzx8066 如楼上所说，最好说清楚点。我仅提供一个参考。PI染色法（活细胞染色）检测细胞凋亡碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种DNA 结合性染料，其激发和发射波长分别为536 ...
夜色星辰1234 我是一个新手， western前后做了两次，均是在130-150之间出现信号很强的非特异性条带，另有少许杂带，而B-actin处信号很弱（原则上说，应在膜的中下近1/3处出现特异性条带），但却几乎看不出来（下图所示），请高手指点，不胜感激！aids610610 上样量一样吗？夜色星辰1234 aids610610 wrote:上样量一样吗？上样体积均是20ul,蛋白定量均是45ug.每次上样之前均先在沸水中煮了5min, ...
流产 请教各位高手，我初涉信号转导方面的实验，想用EGFP表达一段编码信号蛋白的真核序列，这样就会使GFP蛋白和信号蛋白融合在一起，好处是转染的时候比较方便，不用大量的做验证工作，但GFP蛋白相对较大，我担心GFP蛋白会影响信号蛋白的空间结构，使得不能发挥正常的生物学功能，请教有经验的高手，有什么建议？请赐教paroxysm 融合蛋白可能会影响目的蛋白的亚细胞定位这也是标签蛋白为什么都很短的原因之一大鹏鸟 标签蛋白太大 ...
zhangyuxianggx 各位western达人，本人在western操作中屡次失败，现有几个问题跟达人们请教一下：1、我的蛋白是96kDa,选择8%的分离胶有没有问题？2、配制浓缩胶我用的是0.5M Tris-HCL(PH=6.8)，但是看到好多配方用的都是1.0MTris-HCL(PH=6.8)，这个有没有什么影响？3、转膜是用的300mA,40min，看着转膜后胶很干净，就一直用的这个电流和时间。但是最后膜上总是很乱，背景高 ...
lope 请教各位大侠：购买的UPSTATE的TOPFLASH/FOPFLASH质粒，准备做双荧光素酶报告基因检测，看文献上都只是用这个质粒和Renilla的载体共转染细胞，是否这个质粒本身就携带了Firefly萤光素酶呢？我看了说明书，只是说two full and one incomplete copy of the TCF binding site (mutated) followed by three copies in the reverse orientation, upst ...
xiangcate 做动物血管免疫组化结果显示药物能抑制nf-kb通路，并下调MCP-1的表达，但对同样是nf-kb通路下游的IL-8，ICAM-1没有下调作用，如何解释？谢谢！xiangcate 有人知道吗！microlabm300 可能IL-8有其他通路的串话调控paroxysm 很正常。严谨的话，需要染色质免疫共沉淀来确定NFkappaB的下游基因的调控。xiangcate paroxysm wrote:很正常。严谨的话，需要染色质 ...
wgqsdams 各位高手，我们想做miRNA的实验，通过qPCR的方法验证，现在我们自己有引物序列，想找个便宜又有保证的公司进行引物茎环部分的序列设计和合成，请各位高手给指点迷津。谢谢！！masmas 我合引物一般去上海英骏godsay5605 同样推荐英骏，我们合引物也是去他们家epdnge 广州锐博生物可以86964109 最近用上海生工合的，还可以本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法 ...
Drnw 我在紧接翻译区后的3‘UTR区发现一个突变，但如何预测3‘-UTR区的突变是micoRNA结合位点，并与基因的表达有关。急求！！万分感谢！！lide658 把这个基因的名字输入到microrNA预测软件中，然后看你所发现的突变位置是否有microrNA结合，然后再看是不是突变位于种子序列中，如果是可以进一步研究突变与否是否会影响microrNA的结合，进而影响到基因的的表达。Drnw lide658 wrote:把这个 ...
dongfangzhizi06 我要做信号通路(ERK和p38)，请问多少数量的细胞可以提磷酸化蛋白做western blot检测p-ERK1/2和p-p38？六孔板的一个孔够吗？谢谢！民间恺撒 上次我接板时的密度是5×105，提了四个孔的总蛋白，大概浓度在8.5左右。建议6孔板可以使用两个孔叠加在一起，这样蛋白浓度会有所保证。bianbenjamin 我都是六孔板一个孔做的，为了保证蛋白浓度，少加点裂解液即可，我一般是60-80微 ...
wangch84 最近要构建miRNA的表达质粒，要设计引物从基因组中扩增目的基因，发现一些文献里设计引物时用的模板序列是基因组DNA模板序列的反向互补序列，不知具体原理，请赐教。大鹏鸟 DNA是双链啊，PCR扩增出来就都包括了wangch84 to大鹏鸟，有些miRNA位于正链，有些位于负链，具体原理找不到liangpz 这个跟载体有很大关系，取决于载体promoter的方向。如果载体promoter是反向的话，就是这样了 ...
xun梦中 各位大侠好，想请教一下，DNA跑完琼脂糖凝胶电泳，EB染色之后还能做切胶回收吗（排除毒性问题）？在此先谢过各位侠们了啊hdlhq 可以 没有问题shylook 就是得EB染色后你才能看到条带切胶回收呀。。。xun梦中 恩，用Loading buffer作指示的话就得染色。先谢过了啊本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming
dongfangzhizi06 打算培养成骨向诱导BMSCs，请问：诱导剂是溶于培养基中保存（4度和-20度）呢，还是单独保存每次用时再混于培养基中呢？如果是后者，又该在什么温度下保存？dongfangzhizi06 自己顶一下！ruiteluoshuixiu 我觉得是要单独保存啊，如果混了的话，容易影响效果的dongfangzhizi06 谢谢！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都 ...
