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【求助】topflash/foplash的luciferase opening reading fream针对的就是firefly萤光素酶吗?

丁香园论坛

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请教各位大侠:
购买的UPSTATE的TOPFLASH/FOPFLASH质粒,准备做双荧光素酶报告基因检测,看文献上都只是用这个质粒和Renilla的载体共转染细胞,是否这个质粒本身就携带了Firefly萤光素酶呢?我看了说明书,只是说two full and one incomplete copy of the TCF binding site (mutated) followed by three copies in the reverse orientation, upstream of the Thymidine Kinase (TK) minimal promoter and Luciferase open reading frame. 这里的Luciferase没有标明是Firefly的啊,那我要不要再转一个PGL3载体呢???
在线等答案,谢谢啦!
荧光素酶已经带上了,但是不是firefly种属,看说明书上说的。
但kit里的底物应该是针对这个荧光素酶的。
paroxysm wrote:
荧光素酶已经带上了,但是不是firefly种属,看说明书上说的。
但kit里的底物应该是针对这个荧光素酶的。

谢谢你!我买的就是那个KIT,说明书里面我也找不到,身边的人没有做相关方面的研究,还真是难懂呢!
我没找到针对FIREFLY的单词啊。。。还有其他什么可以证明是针对FIREFLY的呢?
准备做topflash,头痛啊
楼主,你好!我现在也要使用TOP-flash荧光报告基因,请问在哪里可以买到?谢谢!
htlongzhou wrote:
楼主,你好!我现在也要使用TOP-flash荧光报告基因,请问在哪里可以买到?谢谢!

UPstate有卖。你现在还做不做呀?我也在做这个东西,质粒已经买了,具体不知道怎么操作,能否告知一二。
高成胡君 wrote:
你现在还做不做呀?我也在做这个东西,质粒已经买了,具体不知道怎么操作,能否告知一二。

我也要做这个,能不能加求求一起讨论。刚进实验室,一团雾水中。529957712
ashimo wrote:
我也要做这个,能不能加求求一起讨论。刚进实验室,一团雾水中。529957712
您好,请问知道怎么做吗?我现在也快疯了,求指点

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