【求助】请教高人，GFP蛋白与信号蛋白融合在一起，会影响其在信传导中的作用吗？
丁香园论坛
3411
请教各位高手，我初涉信号转导方面的实验，想用EGFP表达一段编码信号蛋白的真核序列，这样就会使GFP蛋白和信号蛋白融合在一起，好处是转染的时候比较方便，不用大量的做验证工作，但GFP蛋白相对较大，我担心GFP蛋白会影响信号蛋白的空间结构，使得不能发挥正常的生物学功能，请教有经验的高手，有什么建议？请赐教
融合蛋白可能会影响目的蛋白的亚细胞定位
这也是标签蛋白为什么都很短的原因之一
这也是标签蛋白为什么都很短的原因之一
标签蛋白太大的话很可能会影响目的蛋白的空间构象，建议还是换小标签 的吧。
另外GFP和你的信号蛋白是怎么融合的？出膜的时候会不会被切掉？这也是个问题。
另外GFP和你的信号蛋白是怎么融合的？出膜的时候会不会被切掉？这也是个问题。
大鹏鸟 wrote:
标签蛋白太大的话很可能会影响目的蛋白的空间构象，建议还是换小标签 的吧。
另外GFP和你的信号蛋白是怎么融合的？出膜的时候会不会被切掉？这也是个问题。
流产 wrote:
用的是EGFP表达载体，EGFP连在了我目的蛋白的N段。你说的挺对的，我的目的蛋白从生物信息上分析是初步定位在细胞质内，你说的出膜是不是指细胞膜？
对
学习了，请高人指点啊，最近也一直在做相关的工作！
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
