【求助】P.I.是什么试剂的简称?谢谢
丁香园论坛
4968
在 一篇论文的实验步骤中,其buffer添加了P.I.,我不知其为哪种试剂的简称。希望有高手可以指点。急!谢谢!
什么实验?说清楚点好帮你啊
是做细胞周期或凋亡试验的吗,propidium iodide (PI) 染DNA用的。
<center>
<strong>如楼上所说,最好说清楚点。我仅提供一个参考。<br />
<br />
PI染色法(活细胞染色)检测细胞凋亡</strong></center>
<center>
<font>碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种DNA 结合性染料,其激发和发射波长分别为536nm 和617nm,产生红色荧光。</font></center>
【染料及试剂】
(1) 含0.1%TritonX-100的PBS缓冲液(pH7.4)
(2) PI染液:将PI(碘化丙啶)溶于含0.1%TritionX-100的PBS中,终浓度为50μg/ml,含RNase 100μg/ml,避光保存。
(3) 荧光显微镜
【操作方法】
制备凋亡细胞悬液,浓度为106/ml;
取1ml的细胞悬液,加10μl的PI染液混合,作用10min;
加入5ml PBS,1500r/min离心5min,弃上清,重复洗涤2次;
重悬细胞,滴片并用盖玻片封片;
【结果判断】
在荧光显微镜下选用大于536nm的激发光观察:正常活细胞胞核被PI着染呈红色;早期凋亡细胞胞核浓缩,染色加深,或核染色质聚集于核膜一边,呈新月状;晚期凋亡细胞胞核碎裂成大小不等的原形小体,并被细胞膜所包绕,即凋亡小体。
【染料及试剂】
(1) 含0.1%TritonX-100的PBS缓冲液(pH7.4)
(2) PI染液:将PI(碘化丙啶)溶于含0.1%TritionX-100的PBS中,终浓度为50μg/ml,含RNase 100μg/ml,避光保存。
(3) 荧光显微镜
【操作方法】
制备凋亡细胞悬液,浓度为106/ml;
取1ml的细胞悬液,加10μl的PI染液混合,作用10min;
加入5ml PBS,1500r/min离心5min,弃上清,重复洗涤2次;
重悬细胞,滴片并用盖玻片封片;
【结果判断】
在荧光显微镜下选用大于536nm的激发光观察:正常活细胞胞核被PI着染呈红色;早期凋亡细胞胞核浓缩,染色加深,或核染色质聚集于核膜一边,呈新月状;晚期凋亡细胞胞核碎裂成大小不等的原形小体,并被细胞膜所包绕,即凋亡小体。
首先感谢三位的回复,具体如下。
在一篇英文文献的实验步骤中,红色标记的为P.I.
Cells uspension was then dounced and pelleted at 2500 g for 5min.Nuclei was further lysed in nuclear lysis buffer at
100mg/ml(50mMTris7.0,10mMEDTA,1%SDS,addDTT,PMSF,P.I.,and Superase-in before use)on ice for 10min,and sonicated using Bioruptor(Diagenode)until most chromatin has solubilized and DNA is inthesize range。
谢谢。
在一篇英文文献的实验步骤中,红色标记的为P.I.
Cells uspension was then dounced and pelleted at 2500 g for 5min.Nuclei was further lysed in nuclear lysis buffer at
100mg/ml(50mMTris7.0,10mMEDTA,1%SDS,addDTT,PMSF,P.I.,and Superase-in before use)on ice for 10min,and sonicated using Bioruptor(Diagenode)until most chromatin has solubilized and DNA is inthesize range。
谢谢。
碘化丙啶
感觉是蛋白酶抑制剂
proteinase inhibitor
首先,谢谢大家的帮助,鉴于笔者学疏才浅,以免后来者有所误读,之后我查阅了一篇相关的实验方法,P.I.是蛋白酶抑制剂的英文简称。现把说明书上传。希望对以后可能做此实验者有所帮助。
本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号:shixiongcoming