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如图,请问大家我的probe为什么会有两条带,并且下面的条带是连起来的。引物用退火缓冲液94°C-2min,缓慢降至室温的。
EMSA使用碧云天化学发光试剂盒。结果中没有出现shift带,请问可能是什么原因?
Eason老歌迷
看不到shift带可能是标记的DNA探针量太少或者探针有降解。某些蛋白和探针的结合条件比较特殊,需要优化结合体系。蛋白样本提取质量不高,蛋白降解或者提取量不足。样本中没有可以与探针结合的蛋白。探针与蛋白无特异性的相互作用。转膜效率低,蛋白或者探针未转移到膜上。