蛋白表达量低，并且多是包涵体形式，请问，如果做EMSA，该怎么办呢？

相关实验：凝胶迁移实验（EMSA）

penglimin

2013-01-31

蛋白表达量低，并且多是包涵体形式，请问，如果做EMSA，该如何让改进，可以获得大量的、可溶性的蛋白？我是采用原核表达呢，是要更换表达载体？还是更换原核菌株？感谢高手指点！

1 个回答

bylvjing

2013-03-31

有帮助

我们最近也在做这个，做了一个月，各种优化原核表达的条件，还是多数以包涵体的形式存在。处理方法：1、换载体，我们用的标记基因蛋白可能大了，把GST换成了His，不知道结果怎样。2、用Thermo的试剂盒，它能把包涵体中的蛋白复性，但是价格也不便宜3、技术指导说可以用上清直接和探针结合，毕竟还是有上清还是有少量可溶性蛋白的。不知道对你有没有帮助，你可以试试