【求助】G蛋白偶联受体的检测
丁香园论坛
1994
各位战友,最近投了一篇文章,reviewer的提了一个意见:“Antibodies to GPCRs are notoriously unreliable, and this data would be strengthened by further demonstrating presence of the receptor message in this cells , and/or showing specificity of the antibody used.”我是用western blot检测该受体的表达,如何回答他的问题呢,谢谢
这不是如何回答的问题,而是如何补实验的问题。
显然审稿人对于这个抗体不太信任,要求你要么证明该受体细胞内信号的存在,要么证明这个抗体的特异性。个人认为前者比较容易,你就补充一下相关实验了!
显然审稿人对于这个抗体不太信任,要求你要么证明该受体细胞内信号的存在,要么证明这个抗体的特异性。个人认为前者比较容易,你就补充一下相关实验了!
请教一下,如何证实抗体的特异性呢,我的抗体是从Abcam买的,而且原来也发过文章的
单个用WB去检测受体的存在确实不够。不知道你是不是就是为了证明这个受体在你的细胞中表达。如果是的话,最好还要补充一些实验。比如realtime pcr验证,受体配体结合亲和性的实验,以及这个受体下游特异性通路的分析。这样可能会更有说服力一些。个人观点。
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