想用受体拮抗剂处理细胞，如何证明受体拮抗剂使受体是去了活性?
离醉hfc
我想加个受体拮抗剂，做抑制处理。但是预实验摸浓度时，想用检测膜受体的活性有没有被抑制，但不知道有什么方法，想请教各位。最好是便宜简单的检测方法。
2 个回答
毛利小五郎的徒弟
证明方法：先做拮抗剂处理然后加入受体激动剂看是否有分泌蛋白产生，如没有则说明失活成功
loveliufudan
为了证明受体拮抗剂使受体失去活性，您可以使用以下方法：
放射性配体结合实验（Radioligand binding assay）：该方法可用于测量细胞膜受体的结合活性，利用放射性标记的配体与受体结合，通过测量剩余的未结合的配体来确定受体活性是否被抑制。使用受体拮抗剂处理细胞，如果受体失去活性，则绑定配体的数量会减少。
細胞酶連結免疫吸附分析（Cell-based ELISA）：该方法利用受体特异性抗体来检测细胞膜上的受体活性。在这个实验中，细胞在微孔板上培养并暴露于受体拮抗剂，随后，使用特异性抗体检测细胞膜上的受体。
荧光共振能量转移（Fluorescence resonance energy transfer, FRET）：该方法通过测量荧光蛋白或染料之间的能量转移来确定受体的活性状态。受体和配体可以被标记为不同的荧光蛋白或染料，并通过FRET测量它们之间的距离变化来确定受体是否失去活性。
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