【求助】G蛋白偶联受体定位错位
丁香园论坛
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大家好。
最近在做建一个高表达某G蛋白偶联受体的CHO细胞株，载体是pEGFP-C1。
稳定筛选后，细胞的荧光表达很好。
但奇怪的问题是，该受体定位出现了问题。原本该定位在膜的G蛋白偶联受体，现在基本上呈全细胞分布，而且核尤其亮。百思不得其解。
请各位战友指点。
附图为该细胞的Confocal图，没有染核。
多谢大家啦！
最近在做建一个高表达某G蛋白偶联受体的CHO细胞株，载体是pEGFP-C1。
稳定筛选后，细胞的荧光表达很好。
但奇怪的问题是，该受体定位出现了问题。原本该定位在膜的G蛋白偶联受体，现在基本上呈全细胞分布，而且核尤其亮。百思不得其解。
请各位战友指点。
附图为该细胞的Confocal图，没有染核。
多谢大家啦！
会不会是该受体带上了EGFP后无法定位到膜上了。
谢谢楼上。
初步考虑是这个问题。可还是很奇怪。
这个错误的蛋白为什么细胞没有发现，还奇怪的进入了核？
那这个细胞还能继续做功能实验吗？
比如G蛋白偶联受体激动剂造成的钙内流实验？
初步考虑是这个问题。可还是很奇怪。
这个错误的蛋白为什么细胞没有发现，还奇怪的进入了核？
那这个细胞还能继续做功能实验吗？
比如G蛋白偶联受体激动剂造成的钙内流实验？
如果不是定位到膜上，应该无法继续做功能实验了。
请问下楼上，难道细胞膜上一点点定位正确的都没有吗？
如果该受体的流式抗体，倒是可以用流式检测的方法确定细胞膜上是否表达有该受体。
好的，多谢楼上：）
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