白细胞DNA的制备

（1）采集外周静脉血10ml，加1.7ml ACD（柠檬酸0.48g、柠檬酸钠1.32g、葡萄糖1.47g、加水至100ml,0.6kg/cm2灭菌30min）抗凝。
　　（2）将血液放入已灭菌的50ml塑料离心管内，加30mlSTMT[0.32mol/L蔗糖、10mmol/l Tris-HCl(pH7.5)、5mmol/L MgCl2、1%Triton –X 100]，轻轻上下振荡至透明，红细胞完全溶解。
　　（3）冰浴10min，离心，3000rpm，10min。弃上清，STMT重复处理1～3次。
　　（4）弃上清，白色沉淀物加10ml STE[0.1mol/L NaCl、10mmol/l Tris-HCl(pH8.0)、1mmol/L EDTA(pH8.0)]，先少量，充分混匀，然后加10mg/ml蛋白酶K100μl，20%SDS30μl，摇匀，置37℃水浴15～20h。
　　（5）用等体积饱和酚抽提，3000rpm离心5min。
　　（6）用大口钝缘吸管小心吸取上层水相，加饱和酚和氯仿-异戊醇（24：1）抽提，3000rpm离心5min 。
　　（7）小心吸取上层水相，用等体积氯仿-异戊醇（24：1），抽提，3000rpm离心5min。
　　（8）小心吸取上层水相，加入1/10体积3mol/l NaAc,2.5体积预冷无水乙醇混匀，-20℃过夜。
　　（9）将白色絮状沉淀物用玻璃棒挑出，放入Eppendorf管内，加1ml 75%乙醇4℃静置1h，离心，10000rpm 10min。
　　（10）弃上清，用蜡膜将管口封好，针刺数个小孔，真空抽提（10～15min）。
　　（11）加200μl 1×TE溶解，置4℃保存。
　　（12）对所提DNA用紫外分光光度计进行定量和纯度检测。
　　（13）取2～4μl DNA样品，经琼脂糖凝胶（Agarose）电泳，检查所提DNA的质量及降解情况。