酶组织化学的基本原理
互联网
2914
酶组织化学的基本原理
酶组织化学
是显示酶的活性，即显示酶的催化作用，而不是酶本身，酶本身并不发生反应。在一定pH和适宜温度条件下，组织或细胞中的酶与孵育液中的特异性酶作用底物反应．催化底物形成无色初级反应产物，后者再与某种捕捉剂结合，形成有色的终产物沉淀于酶所在部位，使组织切片中的酶变成显微镜下的可见物。倘若此反应产物仍然无色，则需再经置换剂处理，使五色的反应产物沉淀被置换为有色的最终反应产物。组织细胞内的各种酶仅有少数酶能用于组织化学染色，大部分要通过上述基本原理间接证明酶
的存在。
1．初级反应产物(initial reaction product，IRP) 是指底物被酶直接分解产生的物质。理想的初级反应产物应是既不溶于水，也不溶于脂类的，以免发生扩散。
2．最终反应产物(final reaction product，FRP) 是指不溶性初级反应产物可经偶联和捕捉反应而呈色。
3．偶联和捕捉(coupling and capture) 是指生物合成中，在同一时间内进行两种在性质上完全相反的化学反应，如一个放能反应和一个吸能反应同时进行，即为偶联。放出的能量，常不是直接被利用，而是先被某些化合物捕获(吸能)。机体内最为重要的偶联反应和捕捉活动是氧化磷酸化。
酶具有只作用于该酶底物的性质，称为底物特异性(substrate specificity)。但是，偶尔也有一种底物可以被两种或两种以上酶分解的情况，这样，在底物混合液中孵育组织切片时，一个底物可能同时发生几种酶反应，为获得特异酶反应，必须使用酶抑制剂或酶激活剂进行鉴别。
