材料与仪器
组织
HGUS 缓冲液 磷酸盐缓冲液 乙醇溶液
微量滴定板或者试管
HGUS 缓冲液 磷酸盐缓冲液 乙醇溶液
微量滴定板或者试管
步骤
1. 将组织置于新配制的 HGUS 缓冲液中(含有 X-Gulc 及其他添加物),足以完全浸没材料,试验在微量滴定板或者试管中进行。
2. 吸真空 5~10 min,然后去掉真空条件。
3. 铝箔包裹,37℃ 放置 48 h。
4. 用 100 mmol/L 的磷酸盐缓冲液(pH 为 7.0)洗脱材料。
5. 为了清洗材料以便观察,在 25% 的乙醇溶液中孵育 15~30 min,在 50% 的乙醇溶液中孵育 15~30 min,在 75% 的乙醇溶液中孵育 30 min。
6. 最后,在 90% 的乙醇溶液中(期间更换几次)37℃ 孵育 2~4 h,或者直到所有的叶绿素去掉为止。
7. 样品可以无期限地保存在 90% 的乙醇溶液中。盖紧盖子,避光室温放置,但要经常监测乙醇的含量。
2. 吸真空 5~10 min,然后去掉真空条件。
3. 铝箔包裹,37℃ 放置 48 h。
4. 用 100 mmol/L 的磷酸盐缓冲液(pH 为 7.0)洗脱材料。
5. 为了清洗材料以便观察,在 25% 的乙醇溶液中孵育 15~30 min,在 50% 的乙醇溶液中孵育 15~30 min,在 75% 的乙醇溶液中孵育 30 min。
6. 最后,在 90% 的乙醇溶液中(期间更换几次)37℃ 孵育 2~4 h,或者直到所有的叶绿素去掉为止。
7. 样品可以无期限地保存在 90% 的乙醇溶液中。盖紧盖子,避光室温放置,但要经常监测乙醇的含量。
来源:丁香实验