光敏生物素对探针的标记
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实验试剂
NBT (实验时 15mg溶于200μl70%DMF中)
实验设备
实验步骤
1. 在一支灭菌的Eppendof离心管中加入20μl探针DNA(0.5-1μg/μl,溶解于水中
3. 将装有反应液的离心管置于冰模中,暗室中在光标记灯下照射30分钟(灯距样品15cm)。
5. 加入100μl仲丁醇,混匀。10000rpm离心10min,去上层液,再加入仲丁醇,离心,使水相浓缩至30-40μl。
6. 加入4μl的3M NaAC,混匀,再加入2体积的预冷无水乙醇,混匀,-20℃过夜或-70℃ 15min
注意事项
1. 仲丁醇与水能部分互溶,因此最好先用水将其饱和,以防DNA丢失,如不饱和则可起到浓缩水相的作用,