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大佬们,southern blot 结合标记探针为什么还要染色

相关实验:免疫印迹(immunoblotting)

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dxy_v16q8y54

还有RNA 印迹到底要不要EB染色哇;在胶中加EB是因为在跑电泳的时候EB会结合进去么?

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3 个回答

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sswei

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EB染色剂可以用来检测单链或双链核酸(DNA或RNA)。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小,所以其荧光产率也相对较低。

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balalaLy

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你说的染色是跑胶时候的染色吧,那个是为了方便观察你的dna跑到哪个位置,单纯这个染色跟后续的步骤关系不大

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loveliufudan

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Southern blot实验中,使用放射性或非放射性标记的探针来检测目标DNA或RNA序列的存在。染色的目的是为了显示这些标记的位置,从而确定目标序列是否存在,以及在什么大小的DNA或RNA分子上存在。

在Southern blot实验中,探针会结合到目标DNA或RNA分子上,而探针的标记则需要通过染色来显示出来。染色剂可以与探针标记发生化学反应,形成可见的染色产物,从而帮助确定目标序列的存在。

对于RNA印迹实验,如果使用了非放射性标记的探针,那么通常不需要进行EB染色。因为非放射性标记的探针已经通过其他染色剂(如碘化物或碘化丙啶)染色来显示标记的位置,EB染色对其没有额外的帮助。但是,如果使用了放射性标记的探针,则需要进行EB染色以显示标记的位置,从而确定目标RNA序列的存在。

在DNA或RNA电泳中加入EB的目的是为了帮助可视化DNA或RNA分子的位置。EB是一种荧光染料,可以与DNA或RNA结合,并在紫外线照射下发出荧光。EB分子大小与DNA或RNA分子相似,因此可以与其结合并显示出DNA或RNA分子的位置。EB染色不会影响Southern blot实验中的探针标记染色。

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