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普通显微镜技术

相关实验:显微镜技术

最新修订时间:

简介

普通显微镜由三部分组成:机械部分、照明部分和光学部分,其中机械部分包括镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、镜台和调节器,照明部分被包括反光镜、聚光器、光圈,光学部分有目镜和物镜两部分组成。

原理

普通光学显微镜的显微镜的主要部分是物镜和目镜,为两组焦距较短的凸透镜,其成像原理见图1-1。

图1-1中为方便起见,物镜、目镜都以单块透镜表示。物镜的焦距(F1)短,目镜的焦距(F2)略长。物体AB位于物镜的2倍焦距和1倍焦距之间,所以在物镜的像方形成一个倒立的放大的实像A'B',该像位于目镜的1倍焦距以内,经目镜放大为虚像A"B”,A"B”位于观察者眼睛的明视距离内。


从图上可以看出,A"B”的视角比眼睛直接看AB时的视角大得多,所以我们用显微镜可以看清非常微小的物体,只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身,而是物体被物镜、目镜所成的已经放大了2次的倒立的像。

用途

普通光学显微镜,其分辨率达微米级,在细胞生物学领域,它主要用于日常观察组织的显微结构以及细胞的形态、数量及生长状态等。

材料与仪器

器材:材料“a”字片,红绿羊毛交叉片,人血涂片,双层油镜瓶,擦镜纸,普通显微镜。
试剂:无。

步骤

普通光学显微镜的基本过程可分为如下几步:


(一)低倍镜的使用方法


A. 取镜和放置:取显微镜时,右手握住镜臂,左手托住镜座,将其轻放在操作者前方略偏左侧,显微镜应离实验台边缘至少一拳的距离。


B. 对光:转动粗调节器,使镜台下降,使物镜与载物台距离拉开,转动物镜转换器,使低倍镜对准通光孔(转动时听到咔哒声时,表明物镜光轴已对准镜筒中心),打开光圈,上升聚光器,将反光镜凹面转向光源,一边在目镜上观察,一边调节反光镜方向,直到视野内的光线明亮且均匀为止。


若使用电光源显微镜,首先打开显微镜电源开关,然后使低倍镜对准通光孔,开大光圈,上升聚光器并调节光线使视野明亮适中。


C. 放置标本片:取标本片,盖玻片面朝上放在镜台上,用移片器将待观察部位移到通光孔的正中。


D. 调节焦距:从显微镜侧面注视着物镜镜头,同时慢慢转动粗调节器,使镜台上升至物镜距标本片约5 mm处,然后一边在目镜上观察,一边缓慢转动粗调节器,使镜台缓慢下降至视野中出现清晰的物像。

(二)高倍镜的使用方法


A. 选好目标:一定要先在低倍镜下把待观察部位移动到视野中心,将物像调节清晰。


B. 转换高倍物镜:为防止镜头碰撞玻片,从显微镜侧面注视着,慢慢地转动转换器使高倍物镜镜头对准通光孔。


C. 调节焦距:向目镜内观察,一般能见到一个模糊的物像,稍稍调节细螺旋,即获得清晰的物像。若视野亮度不够,可上升聚光器和开大光圈。

(三)油镜的使用方法


A. 选好目标:必须先在低倍镜、高倍镜下观察,将待观察部位移到视野中心。


B. 转换油镜:转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在玻片观察部位滴一滴香柏油,然后从侧面注视着镜头与玻片,转动转换器使油镜镜头浸入油中。


C. 调节光亮:将聚光器上升到最高位置,光圈开到最大。


D. 调焦:一边观察目镜,一边稍稍调节细调节器,使物像清晰。若目标不理想或不出现物像,需要重找,在加油区之外重找应按低倍→高倍→油镜程序。在加油区内重找应按低倍→油镜程序,以免油玷污高倍镜头。


E. 擦净油镜头和标本片:油镜使用完毕后上升镜头约10 mm,把镜头转到一边,取擦镜纸,滴少许二甲苯,将镜头上和标本上的香柏油轻轻擦去,再用干净擦镜纸擦干净,擦拭时要顺镜头的直径方向,不要沿镜头的圆周擦。

注意事项

1. 取放显微镜时要轻拿轻放,持镜时必须一手握镜臂,另一手托住镜座,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其他地方。


2. 不可把显微镜放置在实验台的边缘,镜筒倾斜角度不得超过45°,以免碰翻落地。


3. 在上升镜台(或下降镜筒)、转换物镜时,一定要从显微镜的侧面注视着,切勿边操作边在目镜上观察,以免物镜与标本片相碰,造成镜头或标本片的损坏。


4. 需要更换标本片时,使镜台与物镜头远离,方可取下标本片。


5. 标本片上待观察部位要对准通光孔中央,且不能放反,否则高倍镜和油镜下找不到物像。


6. 转换物镜时应转动物镜转换器,切勿手持物镜移动。


7. 显微镜使用完毕后,必须复原,其步骤是:取下标本片,转动转换器使镜头离开通光孔,下降载物台,竖立反光镜,下降聚光器(但不要接触反光镜),关闭光圈,玻片移动器回位,盖上绸布或外罩,放回显微镜柜内。


8. 保持显微镜清洁。光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭,切忌口吹、手抹或用布擦;机械部分可以用布擦拭。

常见问题

常见问题 1

问题表现:看不到物像


可能原因1:物镜未对正通光孔

解决方案1:应对正后再观察


可能原因 2:标本未放到视野内

解决方案 2:应移动标本至通光孔中央


可能原因 3:调节器转动得太快,超过焦点

解决方案 3:应重新调焦


可能原因 4:视野内光线太强,不易观察到未染色的标本片
解决方案 4:将光线调暗一些再观察

来源:丁香实验

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