液体 怎么进行显微镜制片 两次染色怎么操作

将待测藻液通过稀释或离心浓缩，调整OD值至0.15左右，与终浓度为0.05μg/ml-1μg/ml的BODIPY荧光染料和终浓度为0%-40%的DMSO混合后，在25℃-60℃温度范围内，避光染色10min，选择400-600nm作为激发波长，测定在发射波长450-700nm之间的荧光强度，荧光强度与藻细胞中油脂含量呈正相关，可用于进行相对或绝对定量

对于纯藻液和放在废水中的藻液的显微镜制片和荧光染色，以下是一种操作合适的方法：

1. 准备显微镜载玻片：在干净的显微镜载玻片上滴加适量的藻液。可以使用移液器或者微量吸管进行滴加。

2. 干燥载玻片：将滴加的藻液载玻片置于洁净环境中（例如无尘培养箱或洁净工作台），使其在室温下自然干燥。避免直接暴露于阳光下，以防止藻液中的细胞失去活性。

3. 荧光染色：

a. 准备SYTO Green I和PI染色溶液。根据染色试剂的说明书，将合适浓度的染色溶液配制好。

b. 在干燥的载玻片上滴加适量的SYTO Green I染色溶液，覆盖整个载玻片表面，避免气泡的产生。孵育一段适当的时间，以让荧光染料与藻细胞结合。

c. 小心地从载玻片上除去多余的染色液，可以用纸巾轻轻吸去多余液体，避免过度干燥。

d. 在干燥的载玻片上滴加适量的PI染色溶液，覆盖整个载玻片表面，避免气泡的产生。孵育一段适当的时间，以让PI染料与藻细胞结合。

4. 观察显微镜制片：将准备好的显微镜载玻片放入荧光显微镜中进行观察。根据荧光染料的特性，选择适当的滤光片和激发波长来观察和拍摄荧光信号。