简介
电镜法检测支原体污染是一种利用电子显微镜观察培养细胞中支原体污染情况的方法。
原理
电镜观察法检测支原体污染的基本原理是利用电子显微镜的超级放大功能,可直接观察培养细胞中支原体污染情况。
材料与仪器
器材:
① 扫描电子显微镜
② 盖玻片
③ 平皿
④ PBS 溶液
⑤ 2.5% 的戊二醇
⑥ 乙酸异戊酯
⑦ 二氧化碳
⑧ 金
步骤
电镜观察法检测支原体污染的基本过程可分为以下几步:
A. 将细胞传代至贴有盖玻片的平皿中
B. 培养 24 h 后取出
C. 使用 PBS 溶液洗涤
D. 使用 2.5% 的戊二醇或 PBS 固定 15 分钟后再用 PBS 洗涤
E. 用 1% 的锇酸固定 30 分钟后用 PBS 洗涤
F. 使用乙酸异戊酯脱水
G. 使用二氧化碳冰点对其进行干燥
H. 喷金
F. 利用扫描电镜观察,照相
来源:丁香实验