细胞污染与防治

首先，全程注意无菌操作；其次，所用器材高压灭菌，试剂若不是无菌则需要 0.22 μm 水系或有机系过滤器进行灭菌；最后，可在培养基中加入 1% 的双抗，防止污染。

电镜法检测支原体污染是一种利用电子显微镜观察培养细胞中支原体污染情况的方法。

通过冲洗单层培养物或通过离心重悬非贴壁细胞，以高浓度抗生素清洗培养物数次，然后将培养物传代，用加抗生素的培养基传三次，再用不加抗生素的培养基传三次，每次传代后都要检测是否污染。

1) 用含 0.53 mmol/LEDTA、0.05% 胰蛋白酶的 HBSS 洗涤培养物一次。2) 加入同样浓度的新配制的胰蛋白酶于培养物中，室温放置 4 分钟。3) 用吸管吸取胰蛋白酶上下吹打细胞以清洗培养物。在吹打过程中变圆的成纤维细胞渐被去除，只留下上皮细胞。4) 再加入新鲜培养液以灭活残留的胰蛋白酶。