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细胞污染与防治

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如何防止细胞污染?
首先,全程注意无菌操作;其次,所用器材高压灭菌,试剂若不是无菌则需要 0.22 μm 水系或有机系过滤器进行灭菌;最后,可在培养基中加入 1% 的双抗,防止污染。
电镜法检测支原体污染
电镜法检测支原体污染是一种利用电子显微镜观察培养细胞中支原体污染情况的方法。
方案19.4 消除微生物污染
通过冲洗单层培养物或通过离心重悬非贴壁细胞,以高浓度抗生素清洗培养物数次,然后将培养物传代,用加抗生素的培养基传三次,再用不加抗生素的培养基传三次,每次传代后都要检测是否污染。
降低上皮细胞培养过程中的污染
上皮细胞易存在纤维细胞污染,其污染程度能够采用特异的中等纤维蛋百亚基波形蛋内(vimentin,作为成纤维细胞的标记)和角蛋白(作为上皮细胞的标 记)抗体进行双重免疫荧光染色。关于如何降低污染的方法前面已述及;另一种用来降低贴壁上皮细胞群屮成纤维细胞数量的方法是采用不同浓度的胰蛋白酶化。
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