简介
培养法检测支原体污染是一种可靠且成本低廉的方法,但培养周期较长,常用于细胞以及临床治疗细胞的支原体检查。
原理
培养法检测支原体污染的基本原理是利用营养丰富的培养基,直接对待检细胞、血清等进行支原体培养后进行检测。
材料与仪器
器材:
① 支原体肉汤培养基
② 精氨酸肉汤培养基
③ 支原体琼脂培养基
④ 培养箱
⑤ 显微镜
步骤
培养法检测支原体污染的基本过程可分为以下两步:
A. 样品的储存样品如在 24 h 以内进行支原体检测者可储存在 2~8 ℃;如果超过 24 h 样品应放置于 - 20 ℃ 以下保存。
B. 采用支原体琼脂培养基(半流体)检查支原体将样品分别接种 10 ml 半流体培养基(已冷至 36 ℃),每支培养基接种样品 0.5~1.0 ml,置 36 ℃ 培养 21 d,每隔 3 d 观察 1 次。
来源:丁香实验