简介
考马斯亮蓝法操作简单快速，近年来在某些方面有取代经典 Lowry 法的趋势。
原理
比色法（考马斯亮蓝法）测定蛋白质总含量的基本原理是考马斯亮蓝（Coomassie brilliant blue）G-250 在 一定浓度的乙醇和酸性溶液中呈红色。在此溶液条件下，考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合，并导致考马斯亮蓝 G-250 的颜色从红色变为蓝色，最大光吸收峰从 465nm 移至 595nm 。考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质的复合物在 595nm 波长处具有很高的光吸收系数，并与溶液中的蛋白质浓度呈正比。
材料与仪器
器材：分光光度计或酶标仪
试剂：
①考马斯亮蓝 G-250
②95％ 酒精
③85％ 浓磷酸
④H2O
步骤
比色法（考马斯亮蓝法）测定蛋白质总含量基本过程可分为如下几步：
A．染料溶液制备
考马斯亮蓝 G-250 0.1g 溶于 95％ 酒精50ml，再加 85％ 的浓磷酸 100ml，用 H2O 稀释至 1 000ml，混匀备用
B. 将染料溶液加入标准品或样品溶液中，混匀后室温放置 5 分钟，用分光光度计或酶标仪测定吸光度即可。
注意事项
1.在蛋白质浓度过高时，反应时间过长易发生沉淀，应该尽可能在 10 分钟内测完标准品和样品，减少误差。
2．最好使用一次性的比色杯或者多孔板，着色后的杯子很难洗净。
来源：丁香实验
