材料与仪器
细胞
EDTA-PBS 洗涤缓冲液 乙醇 RNA 酶 PI 溶液
流式细胞计量术
EDTA-PBS 洗涤缓冲液 乙醇 RNA 酶 PI 溶液
流式细胞计量术
步骤
1. 在 5 mmol/L EDTA-PBS 中洗 1X106 细胞,重悬于 300 μl 洗涤缓冲液中。加 700 μl 100% 的冰冷乙醇,滴加,并轻微搅拌。旋转搅拌混匀。
2. 14000 g 短时离心沉淀细胞。吸出上清,在 500 μl 洗涤缓冲液中重悬细胞。加 50 μl RNA 酶在室温下孵育 30 分钟酶切 RNA。
3. 加入 500 μl PI 溶液,旋转搅拌,按上述方法进行流式细胞计量术分析。
2. 14000 g 短时离心沉淀细胞。吸出上清,在 500 μl 洗涤缓冲液中重悬细胞。加 50 μl RNA 酶在室温下孵育 30 分钟酶切 RNA。
3. 加入 500 μl PI 溶液,旋转搅拌,按上述方法进行流式细胞计量术分析。
来源:丁香实验