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简介
来源:丁香实验
操作方法
1. 标本固定; 2. PBS洗涤2×3 分钟; 3. 1 %H2O2(或1 %H2O2甲醇)抑制内源性过氧化物酶,室温10~20 分钟; 4. 正常血清(1:10)孵育,室温20 分钟; 5. 滴加酶标记的抗体37 ℃1 小时或4 ℃过夜; 6. PBS洗3×3 分钟; 7. DAB+H2O2显色5~10 分钟,镜下控制染色结果。DAB+H2O2应
间接法1. 标本固定; 2. PBS洗涤2×3 分钟; 3. 1 %H2O2(或1 %H2O2甲醇)抑制内源性过氧化物酶,室温10~20 分钟; 4. 正常血清(1:10)孵育,室温20 分钟; 5. 滴加第一抗体,37 ℃1 小时或4 ℃过夜; 6. PBS洗3×3 分钟; 7. 滴加酶标二抗,室温一小时; 8. PBS洗3
PAP法(过氧化物酶抗过氧化物酶抗体复合物法)1. 标本固定后,PBS洗涤; 2. 1 %H2O2(或1 %H2O2甲醇)阻断内源性过氧化物,室温10~20 分钟; 3. PBS洗2×3 分钟; 4. 正常血清(二抗的正常血清)孵育,室温20 分钟; 5. 滴加一抗,室温1 小时或4 ℃过夜; 6. PBS洗3×3 分钟; 7. 滴加二抗,室温30 分钟;
双PAP法1. 标本固定后,PBS洗涤; 2. 1 %H2O2(或1 %H2O2甲醇)阻断内源性过氧化物,室温10~20 分钟; 3. PBS洗2×3 分钟; 4. 正常血清(二抗的正常血清)孵育,室温20 分钟; 5. 滴加一抗,室温1 小时或4 ℃过夜; 6. PBS洗3×3 分钟; 7. 滴加二抗,室温30 分钟;
ABC法(卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法)1. 标本固定后,PBS洗涤; 2. 1 %H2O2(或1 %H2O2甲醇)阻断内源性过氧化物,室温10~20 分钟; 3. PBS洗2×3 分钟; 4. 正常血清(二抗的正常血清)孵育,室温20 分钟; 5. 滴加一抗,室温1 小时或4 ℃过夜; 6. PBS洗3×3 分钟; 7. 滴加二抗,室温30 分钟;
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