微量样本核酸

从微量样本中提取 DNA。微量样本包括：微量血液样本，如低至 1μl 全血；微量细胞样本，可低至 100 个细胞，如显微切割细胞、流式分选细胞等；或小于 10mg 组织，如穿刺样本、活检样本；以及骨骼或化石等疑难样本。

单细胞测序可以研究单个细胞内的基因情况，同时解决了用组织样本测序无法解决的细胞异质性难题。但是我们常提到的单细胞测序方案并不是仅对单个或者几个细胞进行测序，而是在单细胞分辨率下对成千上万个细胞进行测序。那么如果真的只有一个细胞或极微量的核酸，又该采用什么手段对其基因组和转录组进行分析呢？单细胞/微量核酸扩增方案可以富集核酸样本，应对后续各种分子研究。

从微量样本中分离 RNA，微量样本包括：微量细胞样本如低至 1 个细胞、流式分选细胞（FACS）样本；微量组织样本如低于 2μg 的组织样本如穿刺样本（FNA）、激光显微切割（LMD）样本等。B 图的结果显示，即使是单个细胞提取的 RNA，依然可以检测到 β-actin 相对应的 CT 值，且随着细胞数量的增加，相对应的 CT 值也随之表现更好。

荧光定量 PCR 技术可以实现 RNA 的相对定量，广泛应用于分子生物学研究及疾病相关研究。QIAGEN QuantiNova PCR 系列可支持包括一步法、多重等多种 qPCR 应用；超快速的反应体系 30 min 即可完成实验及独特的颜色指示方案杜绝加样错误；LNA（锁核酸）技术加持增强引物或探针的灵敏度和特异性。

快速发展的高通量测序技术为从不同类型起始样本中精确而灵敏地解析基因密码提供了可能。但在实际的实验过程中，疑难样本的 DNA 常因含量低、质量差而极大地限制了高通量测序技术的应用，主要表现在无法满足建库过程所需的最低条件。很多研究人员面对不足 1 ng 的样本往往束手无策，实际上随着生物技术和酶活性的进步，目前的技术已经可以针对 10 pg 样本进行全基因组建库（如需对 DNA 进行打断则最低起始量

低至单个细胞的 DNA&mRNA 共提取方案，起始样本支持显微切割细胞、流式分选细胞、循环肿瘤细胞（CTCs）、胎儿细胞、干细胞、T 细胞等。

环境样本中的核酸，主要来源包括微生物以及生物脱落的组织、分泌物、排泄物、血液或尸体等，分布在各种水体、土壤、沉积物或空气等环境中，是微生物和脱落核酸的混合物，这两类核酸在上述环境样本中存在较少。不同来源的水体和土壤是环境相关研究课题的主要样本类型。

游离核酸（包括 cfDNA 和 cfRNA) 是指在生物体液中发现的游离于细胞外的核酸，游离核酸的来源分为内源性和外源性，可以是细胞凋亡释放到体液中的内源性核酸，也可以是人体感染病原微生物后由微生物产生的外源性核酸。游离核酸可以用于癌症的早期诊断、预后评估，也可以用于病原感染的诊断，根据实验目的不同，采集体液样本类型不同，核酸纯化方案也有一定区别。

RNA 测序 (RNA Sequencing，简称 RNA-Seq) ，是基于高通量测序技术的转录组学研究方法，可以快速对基因组中的 RNA 种类和数量进行分析，揭示特定生物学或疾病发生过程中的分子机制。RNA 文库制备通常需要 100 ng 以上的起始 RNA，然而实际的科研实验中常会遇到样本本身较少或类型特殊，导致 RNA 起始量不足的情况，给建库实验带来极大的挑战。本章内容我们将为大家介绍微