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亚硫酸氢盐修饰后测序法检测甲基化
亚硫酸氢盐修饰后测序法主要可用来检测甲基化。
实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
甲基化特异PCR
甲基化特异PCR (methylation-specific PCR,MS-PCR) 是一种特异位点甲基化检测技术,是研究 DNA甲基化最为常用且准确度较高的方法之一。目前用于甲基化特异PCR的方法主要有1种:甲基化特异PCR。
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DNA甲基化
重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变,用PCR扩增(引物设计时尽量避免有CpG,以免受甲基化因素的影响)所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶。最后对PCR产物进行测序,并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点的甲基化状态。
操作方法所属实验:亚硫酸氢盐修饰后测序法检测甲基化
基本方案
随着科学技术的不断发展,在传统PCR技术的基础上发展了包括逆转录PCR,实时定量PCR等新技术,以及多重PCR、DNAshuffing,PCR芯片,固相PCR等改良技术。目前有运用恒温快速扩增技术作为DNA甲基化特异性检测方法来验证癌症的基因,为医学领域的深入探究提供新方法新思路。文献:廖萍,刘茶珍,重组酶介导扩增技术与传统聚合酶链反应技术在甲状腺癌DNA甲基化检测中的应用对比,中国医药,2003,8(6):797-799
操作方法所属实验:聚合酶链反应构建重组 DNA
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DNA甲基化的介绍及其抑制剂

一、 什么是DNA甲基化在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,这常见于基因的5'-CG-3'序列。大多数脊椎动物基因组DNA都有少量的甲基化胞嘧啶,主要集中在基因5'端的非编码区,并成簇存在。甲基化位点可随DNA的复制而遗传,?因为DNA复制后,甲基化酶可将新合成的未甲基化的位点进行甲基化。DNA 甲基化是表观遗传学的重要部分,同组蛋白修饰相互作用,通过改变染色质结构,调控基因表达。在哺乳类细胞或人体细胞中,DNA 甲基化与细胞的增殖、衰老

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DNA甲基化研究方法的回顾与评价(下)

2.2.10 DNA微阵列法 Yan等2001年[40]将以分子杂交为基础的微阵列技术应用于DNA甲基化检测中,这种方法是基于杂交的寡核苷酸微阵列,是一种在基因组中寻找新位点的方法。包括用于整个基因组范围内扫描的差异甲基化(DMH)杂交(Huang等1999年[41])和用于检测某个位点的甲基化特异性微阵列MSO(Gitan等2002年[42])。前者类似于mRNA表达谱或cDNA微阵列,是CpG岛微阵列,后者类似于寡核苷酸微阵列,是针对CpG二核苷酸位点的甲基化特异性寡核苷酸微阵列[26

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Maxam-Gilbert化学修饰法
的寡核苷酸引物和高质量的大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow片段),这在二十世纪八十年代一般的实验室很难做到。但随着M13mp载体的发展、DNA合成技术的进步及Sanger法测序反应的不断完善,至今DNA测序已大都采用Sanger法进行。然而,Maxam-Gilbert法可对合成的寡核苷酸进行测序,可以分析DNA甲基化修饰情况,还可以通过化学保护及修饰等干扰实验来研究DNA的二级结构和DNA与蛋白质的相互作用,这些仍然是Maxam-Gilbert法所独具的鲜明特点。 当然,如同双脱氧终止法
操作方法所属实验:DNA 测序
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DNA甲基化研究方法的回顾与评价(上)

摘要: DNA甲基化是表观遗传学(Epigenetics)的重要组成部分,在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育以及人类肿瘤发生中起着重要作用,是目前新的研究热点之一。随着对甲基化研究的不断深入,各种各样甲基化检测方法被开发出来以满足不同类型研究的要求。这些方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找。本篇将主要介绍目前存在的大部分DNA甲基化研究方法,并对其相关特性进行了简要分析与总结。 关键词:表观遗传学;DNA甲基化;甲基化研究

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DNA甲基化的整体解决方案

1.DNA甲基化研究近期进展 2.DNA甲基化技术路线介绍 3.如何解决目前DNA甲基化样本处理中的瓶颈难题 4.DNA甲基化检测的金标准——焦磷酸分析技术

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DNA甲基化研究概述及热点应用解析

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DNA甲基化研究方法的回顾与评价

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表观遗传之DNA甲基化技术交流

DNA 甲基化应用日益增多,它是什么?常用技术有哪些?甲基化转化和建库有什么流程?诺唯赞甲基化负责人深入浅出的介绍,为您提供保姆式解决方案。

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