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某些病毒（如流感病毒、副流感病毒、腮腺炎病毒、脑炎病毒等）能选择性地凝集个别动物的红细胞，这种现象称为红细胞凝集现象，简称血凝现象，当这些病毒与相应的抗体发生特异性结合后，失去了使红细胞凝集的能力，称为红细胞凝集抑制。红细胞凝集与红细胞凝集抑制试验比补体结合试验操作简单、快速、节约，并且血凝抑制试验具有敏感性高，特异性强的优点。来源：《病毒学检验》

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用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验

在制备新的病毒毒种贮液，或为蛋白质的生产和分析而进行感染时，了解毒种的滴度是非常重要的。来源：《病毒学检验》

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测定病毒滴度

2或3个细胞周期。 4. 如果病毒携带了一个组织化学标记基因如lacZ则感染的细胞可用Xgal染色，不需要进行药物选择。计数蓝染的细胞，接着按步骤7计算滴度。5. 如果病毒携芾了药物抗性基因，将感染的细胞分传入选择培养液中。如果抗性基因是neo将细胞按1：10至1：20传代，分传入2个各含有G418的10 cm 的培养皿中，培养3天。 6. 换液，内含适当的选择药物。共培养7~10天，届时应可见到细胞克隆。在克隆扩散之前计数其数目7. 按如下公式计算滴度（RCFU表示抗性CFU）或，如果病毒

操作方法所属实验：反转录病毒产毒细胞系建立实验

噬斑分析测定滴度

每孔中的噬斑数确定滴度，再乘以稀释倍数。

操作方法所属实验：痘苗病毒储液制备

问老师们，请问为什么igg比igm量多得多，但是测抗体滴度的时候，滴度越高代表是近期感染

Dr_劉医生

因为这两个抗体产生时间就不一样，在某一时间点的量肯定就不一样。IgM是近期感染的抗体，一般在感染后3-5天出现。IgG是在IgM产生后出现的，在感染后10-15天出现。

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问病毒做TCID50确定滴度的问题

丁香实验

如果有cpe而没有荧光，应该修饰区域的丢失。我之前遇到过这种情况。

实验问答1 回答975 围观

处女座实验狗都无法抵抗的慢病毒滴度标定方法

绝对定量时代——引领慢病毒行业新标准高大上的慢病毒是怎样炼成的（一）慢病毒活性滴度用什么单位？看 TU！看 TU！看 TU！ TU = transducing units，即每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。其他的 VG/mL，VP/mL 都是所有病毒颗粒数，死的活的都算上，一片虚假繁荣，请自由玩儿去！慢病毒活性滴度怎么标定最准？绝对定量！绝对定量！绝对定量！又绝对又定量的方法，准到不要不要的！再说了，这「绝对定量」是医疗级病毒产品的公认滴度检测方法，诺华、Juno

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病毒滴度的测定

稀释计数法滴度单位：TU/ml，指每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。”TU”为”transducing units”的缩写，中文为“转导单位”，表示可以感染并进入到靶细胞中的病毒基因组数。第一天细胞准备将生长状态良好的293T细胞消化计数后稀释至1×105/ml，加入96孔板，100µl/孔，为每个病毒准备10个孔。放入37℃，5%CO2培养箱中培养。第二天加病毒在EP管中做10倍梯度稀释，连续10个稀释度。稀释方法如下：每种病毒准备10

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50%终点法测定病毒滴度实验

测定病毒滴度可应用于衡量病毒毒性。

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大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验

对于某些用途来说（如体内感染细胞），有必要浓缩反转染病毒原液以增加其滴度。如果想要用不编码可选择标记的病毒感染一群细胞，必须用髙滴度的病毒。操作中需用几百毫升至几升的产毒细胞上清。

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噬斑试验测定滴度

1. 用含 10％胎牛血清的 TNM-FH 培养液稀释处于对数生长期的 Sf 9 细胞至约 5 × 105 细胞/ml。在噬斑试验之前几小时，以两种不同的密度（2 × 106 和 1.5 × 106 细胞/ml）将细胞种于 60 mm 组织培养皿中。对病毒储液的每一稀释度均设复皿（二个组织培养皿），27℃ 培养。2. 根据病毒储液的来源，用 TNM-FH /10％ FBS 培养液制成 5 ml 病毒储液的系列稀释液。高滴度病毒储液：10-6、10-7、10-8 稀释转染上清（野生型病毒环状

操作方法所属实验：杆状病毒储液制备实验

免疫染色法滴度测定

ml 的邻联茴香胺溶液到 10 ml 的PBS/H2O2 中。同样，也可以按照操作手册使用底物片剂。13. 每孔加入 0.5 ml 的邻联茴香胺底物溶液，轻轻晃动，放置10 min (弱抗体需要的时间长）。用显微镜观察感染细胞的噬斑，反应完成后，用水洗培养板，并加入 1 ml 的水使其保持湿润。14. 对染色的噬斑进行计数，乘以稀释倍数，得到的滴度表示为感染单位（pfu）/ml。

操作方法所属实验：MVA 病毒储液制备实验

问想有偿求测定了滴度的呼吸道合胞病毒RSV,实在测不出来滴度，搞的焦头烂额

huarenqiang5

1 细胞基质的确定:建议选择Hep2 细胞作为病毒培养细胞基质。 2 病毒培养条件的确定：确定 RSV培养条件为 002 MOI接种,37 ℃吸附1~2h,弃病毒液,加入含 2%胎牛血清的MEM 病毒培养液 37 ℃,5% CO，培养7~9d，病变达70%~90%时收获病毒液,7d判定结果。提高滴度需要从筛选 RSV培养细胞基质、优化培养条件、确定病毒接种 MOI 及培养时间这几点来把握。

实验问答2 回答636 围观

问免疫组化过程中要注意哪些问题？如何确定抗体的滴度？

小暮

实验问答1 回答658 围观

病毒滴度的问题

bioangelwx15问：本人刚做慢病毒赶染实验，有些问题还不懂，想请教下大家，病毒感染细胞时是不是只要病毒的量够就行了呢？是不是病毒滴度大就少加病毒液，滴度小就多加呢？当然，前提是我要保证感染的细胞有充足的氧气供应，即使病毒液多加也有氧气供应，只是我不知道病毒浓度大小对感染细胞的效率有影响么？也就是说当病毒总量一定，病毒滴度大感染时加的量少和病毒滴度小，感染时加的量大，感染效率会不会一样呢？问题很弱，我是个新手，还望大家不吝赐教啊，感激，感激：）丁香园网友ggppllzzww认为：首先要

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噬菌体滴度的测定

稀释液10ml，快速涡旋，室温孵育1-5min。 7. 转移至含有45℃顶层琼脂糖凝胶的管中，快速涡旋混匀，立即倾倒至预热的LB/IPTG/Xgal平板上，轻缓摇动平板使顶层胶均匀分布。 8. 冷却平板5min，37℃倒置培养过夜。 9. 噬斑计数以噬斑数为100左右的平皿为准，噬斑数乘以稀释度即可获得每10ml噬菌体的滴度-噬斑形成单位（pfu）

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病毒的滴定实验

在进行病毒的鉴定或疫苗的效价测定时，首先应滴定病毒，以确定用量单位或疫苗的滴度。

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作为 DNA 递送媒介的 SIV 载体

提供一些如何使用微型SIV 包装系统和SIV 基因转移载体来获取由S IV 发展来的高滴度和安全的慢病毒载体的方法。作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」

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液体培养基中细胞滴度的检测

在复合培养基如YPAD中，当接种足量的细胞并于30℃培养过夜（16小时），使其分裂10代，大多数酵母菌株滴度可达2 x 108到3 x 108个细胞/ml; 而在合成培养基如SC减样选择培养基中，细胞滴度为1 x 107到2 x 107个细胞/ml。可以用几种方法来检测培养物的滴度，如测定600nm处的光密度（OD600)，或用血细胞计数器和显微镜进行细胞计数。对大多数菌株来说， OD600为0.1相当于细胞滴度为1x106个细胞/ml。用血细胞计数器检测细胞密度比较费时间，但可以直接观察酵母

操作方法所属实验：酿酒酵母培养条件实验

慢病毒产生和滴度

慢病毒产生和滴度的基本过程可分为如下几步：A. 建立抗生素杀伤曲线。在生产慢病毒和滴度之前，建议绘制用于选择 sgRNA 文库的抗生素和相关细胞系中用于筛选的其他必要成分的杀伤曲线。为了做到这一点，种子细胞以 10% 的汇合度在含有一系列抗生素浓度的培养基中进行筛选目。B. 每 3 天更换一次含抗生素的培养基。4~7 天后，选择足以杀死所有细胞的最低浓度的抗生素。关键步骤：使用最低浓度的抗生素是很重要的，以避免选择过于严格而偏向于转导多个 sgRNA 的细胞。C. HEK 293

操作方法所属实验：全基因组CRISPR-Cas9基因敲除和转录激活筛选实验