dafa92
如图上方是phos-tag胶的结果,下方是普通的SDS-PAGE结果,左边条带是对照,右边条带猜测被磷酸化。我看有人跑phos-tag胶会迁移出磷酸化蛋白,分的挺开的,不过我这个拖尾而且看不太出明显的条带。还有一个问题磷酸根明明分子量很小,在普通胶上也能造成明显的迁移变化吗?
z流沙z
磷酸化在普通凝胶上能跑出来变化,建议下面那个可以减少上样量更为明显
sswei
原因包括一抗特异性不高,二抗浓度过高等。
loveliufudan
从这张图片上难以确定是否是磷酸化阳性结果。通常使用phos-tag胶可以有效地检测磷酸化蛋白,磷酸化蛋白在phos-tag胶上迁移较慢,通常表现为较重的条带。但是,由于phos-tag胶的缺点,如批次差异和非特异性结合,可能会影响结果的解释。因此,建议结合其他实验数据和相关文献,综合判断是否存在磷酸化蛋白。另外,磷酸根离子是较小的离子,不同于蛋白质,因此在普通的SDS-PAGE胶上可能不会出现明显的迁移变化。
土井挞克树
可以算作阳性,但是抗体特异性差导致条带不是很完美,但是可以看出阳性
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