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科研学霸天团，48小时有问必答

遗传

问CHIP实验超声时片段总是打的不够碎怎么办

bamboopiggy

做好预实验，多做几管，确定合适的超声强度和时间。

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问构建过表达或者敲除细胞株，药物筛选后如何挑取单克隆细胞？

bamboopiggy

可以用梯度稀释法，将细胞稀释后，加入96孔板，找那些有一个细胞的孔，标记好。就可以

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问如何保证所选的是处女蝇？f1代果蝇未处理干净为什么会影响实验结果？

府宅

刚羽化的果蝇翅膀还没有展开，整齐折叠在两侧，呈蓝灰色。在2小时内，翅膀会逐渐展开，并与身体保持微小的角度。而在果蝇腹部的左侧，我们可以看见一个小黑斑，这个小黑斑就是处女蝇的标志

3 回答199 围观

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问ChIP实验研究转录因子，调控因子结合的DNA和组蛋白结合的NDA操作上最大的区别是什么？

whilt-shirt

实际操作上就是转录因子的必须要用甲醛固定，组蛋白看情况，在组蛋白表达的多的情况下可以不使用甲醛进行固定。其余过程就是解交联的时间，组蛋白要适当的增加解交联的时间。将ChIP与第二代测序技术相结合的ChIP-Seq技术，能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段。ChIP-Seq的原理是：首先通过染色质免疫共沉淀技术（ChIP）特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段，并对其进行

2 回答173 围观

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问做ChIP试验,必须做甲醛固定么?

dxyjonas

不一定，有几种其他固定剂在某些实验中效果很好，但甲醛是最常用的，因为它可以将距离较近的DNA和蛋白共价连接在一起。当然，对于一些距离较远的分子，可以使用其他固定剂，如DSG。在设计ChIP实验时，这些都是需要考虑的因素，但在大多数情况下，甲醛是固定样本的良好选择

5 回答461 围观

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问微球菌核酸酶实验 DNA 电泳一直观察不到 200bp 是为什么？

dxy_gm4sarl3

我是先低渗缓冲液处理细胞，然后取沉淀，直接加入微球菌核酸酶缓冲液和微球菌，

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