①胰蛋白酶消化过度：胰酶处理时间过长，可能导致细胞膜蛋白受损，影响细胞贴壁调整消化时间：缩短胰蛋白酶消化时间或降低其浓度，以减少细胞膜蛋白受损。
②微生物污染：支原体感染或其他微生物污染会导致细胞功能紊乱，影响贴壁能力。分离培养物，检测支原体。如果发现支原体污染，应丢弃培养物。
③培养基pH值过碱：培养基pH值过高，可能导致细胞不适应，影响贴壁使用无菌醋酸溶液调整 pH值或充入无菌 CO2以维持适宜的 pH环境。
④细胞老化：细胞传代次数过多，可能会导致细胞老化，失去贴附性复苏新的细胞，使用20%血清帮助细胞复原并注意传代接种的细胞密度和时机。
