月光如盐000
sswei
在细胞融合度达到70—80%时传代,不要过满,及时换培养基
周末也要努力呀
自己提原代细胞传代细胞传不了几代,就是得经常提。
高山云初
有几种可能,离心重悬以后接种到新皿里的细胞悬液没有晃匀,导致细胞密度不均,低密度的地方细胞长不起来?六个皿叠起来放在培养箱里导致氧气进不进去皿里,细胞缺氧?喷了太多酒精流进了皿里导致细胞死亡?细胞飘的多的时候没有及时换液?
skyye
这个一般跟培养条件、血清和消化时间等多种因素有关。如果培养条件和血清等都跟消化前的一致的话,需要考虑下消化时间是不是过久了,可以适度缩短消化时间,只要细胞变圆、轻拍脱落后便即刻终止消化,减轻消化对细胞的损伤
土井挞克树
细胞密度太大了,降低细胞密度试一试
粥辰辰辰辰
有可能是细胞消化过度了,原代细胞本身传代能力是有限的,有些甚至不能传代
此用户已注销
原代内皮细胞本身也就只能传个3-5代的样子,再者内皮细胞的培养过程中需要加些生长因子,DMEM的营养显然是不够的,最好用内皮细胞专用培养基
feixue7758527w
我觉得状态还是可以的,刚传代,细胞数不可能跟传代之前一样的