【求助】天跟胶回收试剂盒老是回收不成功
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求助:用的是天根 的胶回收试剂盒,11管PCR产物,差不多500微升的总体积,上四个孔电泳,电泳后用天根的盒子回收到四个EP管,每管40微升,取5微升电泳,居然没有成功,又取10微升电泳还是没有任何条带,不知道可否有人用天根的盒子,是否遇到这方面的问题,一般100微升的PCR产物,回收到多少体积比较恰当,纠结啊,回收了好几次电泳都没有目的条带,盒子是刚买的新盒子,谢谢好心人帮助
天根的盒子还是很好用的,注意一下手法问题。按照说明书来就行。
提醒你几个小细节:1、胶加热溶解以后一定要放凉了再上柱子。温度高的话挂不上去。
2、样品加到柱子里可以多静置一会儿,离心后可以再过一次
3、洗脱时可以加热65度,这样得率会高点
一般一个小柱子好的时候可以回收到1ug,差的时候也有200-300ng,足够实验用了
提醒你几个小细节:1、胶加热溶解以后一定要放凉了再上柱子。温度高的话挂不上去。
2、样品加到柱子里可以多静置一会儿,离心后可以再过一次
3、洗脱时可以加热65度,这样得率会高点
一般一个小柱子好的时候可以回收到1ug,差的时候也有200-300ng,足够实验用了
楼主的目标片段有多大,太小了就不适合用回收胶试剂盒。
切胶时要准,并且切的体积尽量小,按照试剂盒推荐的胶盒试剂的比例加入试剂1.
另外,纯化PCR产物可以直接用氯仿异戊醇的方法,比回收胶效果更好,整个过程大约1个小时就可以完成了。
切胶时要准,并且切的体积尽量小,按照试剂盒推荐的胶盒试剂的比例加入试剂1.
另外,纯化PCR产物可以直接用氯仿异戊醇的方法,比回收胶效果更好,整个过程大约1个小时就可以完成了。
ymeihzau wrote:
楼主的目标片段有多大,太小了就不适合用回收胶试剂盒。
切胶时要准,并且切的体积尽量小,按照试剂盒推荐的胶盒试剂的比例加入试剂1.
另外,纯化PCR产物可以直接用氯仿异戊醇的方法,比回收胶效果更好,整个过程大约1个小时就可以完成了。
不知道赛百盛的胶回收盒子回收率如何
没用过赛百盛的,还真不知道啊
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