有情燕丶
研究一种药物对细胞的凋亡,测量出ic50,后续处理细胞可以直接用ic50的浓度,还是说要在ic50上下在设置浓度梯度,跑跑wb凋亡蛋白,在选择合适的浓度
粥辰辰辰辰
后续直接用ic50的浓度是可以的
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可以的,凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药物诱导肿瘤细胞凋亡50%,该浓度称为50%抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度,IC50值可以用来衡量药物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低,当然也可以反向说明某种细胞对药物的耐受程度。
loveliufudan
有以下建议:
1. 首先测定药物的IC50值,这可以给出药物达到半数最大效应的浓度。
2. 在IC50浓度的基础上,设置一个浓度梯度(例如IC50的0.1倍、0.5倍、1倍、5倍、10倍等),这可以看出药物在不同浓度下对细胞凋亡的效应。
3. 分别在这些不同浓度下处理细胞一定时间(24小时或48小时),然后进行Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白(比如Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3等)的表达变化。
4. 通过比较不同浓度下这些凋亡蛋白的表达变化,可以选择出一个较佳的药物浓度(既能观察到明显的凋亡效应,又不会过于高剂量)进行后续的细胞凋亡实验。
5. 也可以进行其它凋亡实验(比如流式凋亡分析、DNA梯度电泳、核染色等)进一步验证所选浓度下药物的凋亡诱导效应。
这样从IC50出发,经过Western Blot筛选优化得到一个较优的药物处理浓度,可以使后续实验结果更可靠,避免只依赖单一IC50浓度的局限性。