为什么分离培养骨髓间充质干细胞第一代细胞不生长，长的很稀很慢，怎么提取能加大密度，去除杂细胞呢？

有几个可能的原因以及相应的解决方法：

1. 初始细胞密度不足：确保在分离BM-MSCs时使用足够数量的起始骨髓细胞。增加初始细胞密度有助于提高细胞生长速率。可以尝试使用更多的骨髓细胞或使用较小的培养表面积来增加细胞密度。

2. 细胞营养物质不足：提供足够的培养基和营养物质对细胞的生长非常重要。确保培养基配方正确，包含适当的营养物质，如培养基、血清、生长因子等。

3. 培养条件不适宜：BM-MSCs对于培养条件的要求较为严格。确保培养温度、CO2浓度和湿度等参数适合BM-MSCs的生长。合适的气氛和培养条件对于细胞的增殖和生长至关重要。

关于提高细胞密度并去除杂细胞的方法，以下是一些常用的方法：

1. 细胞密度提高：适当调整细胞的传代比例，增加细胞的倍增数。可以尝试减小传代的时间间隔，以更快地扩增细胞数量。

2. 纯化和去除杂细胞：使用黏附法来分离BM-MSCs并去除非粘附的杂细胞。将细胞在无血清的培养基中进行预培养，较多的杂细胞可能会在预培养过程中被洗去，从而得到相对纯净的BM-MSCs。

3. 细胞筛选：使用特定的细胞表面标记物或细胞选择方法来纯化BM-MSCs，例如磁珠分选或流式细胞术等。这可以帮助去除非MSCs群体中的杂质细胞。

使用优质血清培养，多提取一点骨髓

主要考虑以下几点原因:

1.接种细胞起始浓度太低；

2.胰蛋白酶消化过度；

3.支原体污染。