心细北方
养的min6细胞,第二次传代后,细胞贴壁不牢,很多都在培养液上漂浮着,呈圆形,是培养液的问题吗?求助!
小芙fu
可能培养基问题 细胞密度和传代比例
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如果培养条件不佳,如培养皿和培养基存在污染,或者培养皿的密封性不好等,都会导致细胞生长不良,从而出现漂浮的情况。因此,需要检查细胞培养条件是否符合标准,并采取相应的措施。具体措施如下:1.使用新鲜、无菌的培养基培养基是细胞生长和繁殖的基础,需要使用新鲜、无菌的培养基,并加入足够的营养物质和生长因子,以满足细胞的需要。2.检查培养皿是否有污染现象培养皿是细胞生长和繁殖的场所,需要检查培养皿是否有污染现象,如有需要更换。3.检查培养箱的温度、湿度和二氧化碳浓度是否符合标准培养箱是维持细胞生长和繁殖的重要设备之一,需要检查培养箱的温度、湿度和二氧化碳浓度是否符合标准,以保证细胞的正常生长和繁殖。4.检查培养箱的消毒和清洁情况细胞培养环境需要保持无菌状态,需要检查培养箱的消毒和清洁情况,以确保细胞培养环境无菌。
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有几个可能的原因:
1. 培养基问题:确保您使用的培养基适合MIN6细胞的生长和附着。MIN6细胞通常需要使用含有高浓度葡萄糖(通常为25 mM或更高)的培养基,如DMEM高葡萄糖培养基,并添加适当的补充物,如胰岛素、丙酮酸和谷氨酸。检查培养基配方和质量,确保其配制正确。
2. 细胞密度和传代比例:在进行细胞传代时,控制细胞密度和传代比例非常重要。如果细胞密度过高,细胞之间的竞争和接触不足可能导致贴壁困难。尝试调整细胞密度和传代比例,以确保适当的细胞附着和生长。
3. 细胞健康和状态:检查MIN6细胞的健康和状态。确保细胞没有受到细菌或真菌的感染,并检查细胞是否处于正常的形态和生长状态。如果细胞出现异常,可能需要重新培养新的细胞株。
4. 培养条件和技术:注意培养条件和技术。确保细胞在适当的温度、CO2浓度和湿度下孵育。此外,遵循细胞培养的良好实验室技术,如定期培养基更换、培养器具的消毒和细胞操作的无菌操作等。
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培养液配置、储存不当,如pH值过碱,Gln量太少等原因。