SHSY-5Y细胞如何减少聚团？

1. 调整消化时间:细胞一旦在显微镜下消化成圆球状 立即终止消化，切勿过度
2. 现有细胞立即消化下来，重新混匀细胞，在镜下观察到细胞均匀单个分散为止
3. 调整传代比例，如果细胞仍旧成团，那么增加传代比例

细胞消化后进行离心，再重悬混匀

SH-SY5Y细胞非常敏感，在受到温度、化学或物理刺激后容易出现成团现象。一个视野下，有少量成团现象，无需特殊处理。成团几乎没有铺展开的细胞时，就需要按以下方法特殊处理一下了。

成团处理方法

方法1：低密度接种，用0.125%的低浓度胰蛋白酶消化细胞（时间不超过5min），按1：6比例传代接种，并换新的培养器皿。延长换液时间，3天换液一次，防止细胞脱落。

方法2：使用多聚赖氨酸包被的培养器皿，以加快细胞贴壁速度，降低细胞聚集成团的几率。

方法3：重新铺板，并更换新配制的培养基，并加大血清比例（不超过20%）

方法4：接种时，减少培养基量（如T25加3mL）以加快细胞贴壁速度，等待细胞贴壁后（约8-12小时），再补加培养基。

预防成团的方法：

·控制细胞密度不超过80%，当密度到达或超过80%及时传代；传代时切勿暴力吹打，避免对细胞造成机械刺激

·使用质量好的培养基和胎牛血清，减少内毒素等有害物质对细胞的刺激

·请勿频繁把细胞从培养箱拿出，气温低时需开暖气维持细胞房温度；使用PBS、培养基前37度预热，以避免温差对细胞造成刺激

把握好消化时间，消化不好时候就是容易聚团